24小时热门版块排行榜    

查看: 2004  |  回复: 4

胡程

银虫 (小有名气)

[交流] 为啥跑sdspage,做蛋白样品的时候,样品有粘稠物?求高手指教 已有2人参与

最近用BL21表达一个蛋白,本人一般取菌液1.5到2.5ml之间,加150到250的pbs和对应的5×buffer,100度10min,12000转10min,有沉淀,但吸取上清的时候总有一坨粘稠物,但是上清却很清,根本看不到粘稠物。上样之后也总感觉在孔里沉淀的很慢。以前做样的时候不是这样的,最近总是这样。
还有我最近做的时候,刚开始总是没有沉淀,只有粘稠物,后来我发现降级loading buffer的浓度(我是把它当成6×的来用),煮沸离心之后就有沉淀了,但是粘稠物还是在,就是我第一段描述的问题了。
回复此楼
做最好的自己
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡程

银虫 (小有名气)

求关注,求帮忙
做最好的自己
2楼2015-01-17 14:30:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptttmt

银虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
BL21诱导菌1.5ml菌液才用150ul pbs重悬????太少了!!!我们通常是1ml菌液加150pbs重悬,再加150的2*loading buffer煮样!!另外,按你那比例制样,跑胶应该挺难跑的,样品在压缩胶很难压成一条细线,而且跑出来的胶应该也不会好看。
3楼2015-01-17 18:53:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

aotoulan

禁虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
本帖内容被屏蔽

4楼2015-01-18 09:33:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

胡程

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by ptttmt at 2015-01-17 18:53:41
BL21诱导菌1.5ml菌液才用150ul pbs重悬????太少了!!!我们通常是1ml菌液加150pbs重悬,再加150的2*loading buffer煮样!!另外,按你那比例制样,跑胶应该挺难跑的,样品在压缩胶很难压成一条细线,而且跑出来 ...

我试试,谢谢了
做最好的自己
5楼2015-01-18 12:11:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 胡程 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 8/400 2026-09-01 12:58 by ssyjh
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的? +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 21:30 by xiangy672
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 为什么国自然不能直接公布 +4 bjdxyxy 2026-08-26 4/200 2026-08-26 13:12 by qingmu1201
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 今天务委会开完了,明天出结果吗 +19 angus9576 2026-08-25 23/1150 2026-08-26 10:03 by zp519
[基金申请] 牛来!米来!面来! +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
信息提示
请填处理意见