| 查看: 2896 | 回复: 7 | ||
[求助]
求助等点聚焦测等电点，和毛细管电泳测等电点。
|
|
1、 仪器及缓冲液：我在军事医学科学院用等电聚焦的方法，测定蛋白质的等电点。实验时用的是Bio-Rad的等电聚焦电泳仪。胶和上样缓冲液也只Bio-Rad的产品（预制胶适合分子量为10-100kDa，等电点在3-10之间的蛋白；上样缓冲液中含有0.48g/ml的尿素）。 2、 蛋白情况：我的蛋白是从芒果中纯化的酸性蔗糖转化酶，其他不同植物的这种酶等电点大概在5左右。我做SDS-PAGE蛋白的分子量大概在50 kDa左右，Ntive-PAGE蛋白的位置在145kda(只是大概，非变性电泳不能准确测定分子量)。 3、 实验情况：实验进行的很正常，电泳过程中电压都正常，但是就是跑不出条带，一开始觉得是蛋白的浓度低，后来又增大了上样量和蛋白的浓度也都做不出来(上样量最多的时候蛋白的量达到了SDS-PAGE的50倍以上 )。目前怀疑是较高的尿素引起了蛋白的聚集，导致蛋白没有进入胶里面；也可能是胶的浓度太高蛋白进不去。那边老师说他们做了很多都没有问题，唯独我这一个。 各位大神帮我分析下原因，有知道北京哪里可以作毛细管电泳吗？我想用毛细管电泳测等电点。谢谢  正常SDS-PAGE.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有52人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有7人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有7人回复
-
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有5人回复
-
filecode
已经有11人回复
-
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 氧化物等电点与哪些因素有关？
已经有5人回复
- 请教一下等电点和zeta电位
已经有7人回复
- 蛋白质等电点沉淀之后怎么重新溶解
已经有9人回复
- 同一个蛋白有不同的等电点？
已经有7人回复
- 蛋白质等电点计算 题目解答
已经有35人回复
- Fe2O3的等电点，大家谁知道啊，测出来了两个值，求指教
已经有8人回复
- 怎么计算蛋白的等电点，谢谢
已经有14人回复
- 求助 如何确定物质溶解时的准确PH值呢 等电点怎么测呢
已经有14人回复
- 蛋白质等电点的影响因素
已经有8人回复
- 胶原蛋白等电点的测定
已经有11人回复
- 【求助】用什么方法测定载体氧化铝的等电点
已经有17人回复
- 【求助/交流】关于等电聚焦电泳问题，不甚感激！！
已经有4人回复
- 【求助/交流】等电点的计算
已经有4人回复
- 【讨论】等电点和零电点的区别是什么？
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白质等电点沉淀
已经有6人回复
- 【求助】涉及过等电点的朋友进来看下！~~
已经有17人回复
- 【求助/交流】怎样查找已知基因序列的等电点
已经有5人回复
- 【求助】零电荷和等电点的区别
已经有5人回复
2楼2015-05-12 22:06:50
3楼2015-06-10 18:06:13
4楼2015-06-11 16:36:10
5楼2015-06-12 09:08:25
6楼2015-06-12 16:10:01
7楼2015-11-19 14:39:48
8楼2018-10-16 09:50:02
