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小李爱学习

银虫 (正式写手)

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虫号: 949231
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专业: 食品加工学基础

[求助] 酶蛋白用DSC测定变性温度，没有出峰，求大神帮助。已有1人参与

各位大神求帮助：
　　我从芒果中分离出了蔗糖水解酶，想研究这种酶的变性温度。
   （1）我用ＴＡ－Ｑ１０ DSC仪器分析的，我是用液体盘，每个盘加的7 ul酶液（酶液的浓度可以做到SDS电泳后，考马斯亮蓝染色），每个样品盘温度从30 ℃升到100 ℃，温度速度1 ℃/min。
   （2）按理说蛋白应该在70-80度的时候变性有吸收峰的，但是我的DSC曲线却是平直的一条直线。
   （3）我怀疑是我的纯酶液样品蛋白浓度太低了，后来我又用纯化前的粗提液做了分析，也是平直的一条直线。
   求各位大神做过DSC的帮忙分析下原因，谢谢了。
      前一幅图我觉得是制样的问题，平直曲线请看WP_20141221_005.jpg这幅图，用手机拍的，请见谅。我第一次做DSC，可能有实验细节的问题，请大家提示，谢谢。

WP_20141221_005.jpg

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1楼 2014-12-22 10:41:33

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

hhou221

新虫 (初入文坛)

应助: 4 (幼儿园)
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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
小李爱学习: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢，我用Nano-DSC 做吧 2015-01-13 13:04:19

你可以尝试下把样品阴干了来做，影响DSC灵敏度有两个因素，一个是样品含量（建议你可以把样品阴干成膜后测试），还有一个是升温速率（速度快灵敏度高）。或者用微量的DSC来做，蛋白样品用普通DSC有时候不太好做。

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