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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 小鼠脾淋巴细胞分离
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呀咦呦

新虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠脾淋巴细胞分离 已有1人参与

我在做小鼠实验，想分离脾脏淋巴细胞，现在提不出细胞啊，请各位大神指点一下，十分感谢。
具体实验操作如下：无菌剥离小鼠脾脏，置于5mL Hanks液中清洗一下，转移至4 mL小鼠脾脏淋巴细胞分离液培养皿中，用两个无菌载玻片的粗糙面对脾脏进行研磨，5分钟内完成，用枪将细胞悬液缓慢冲几次（勿剧烈），经200目尼龙网过滤，放进离心管内，沿离心管壁小心加入1 mL RPMI-1640液，在2000 rpm离心15 min，用移液枪小心吸取两层液面分界线下的细胞层即为淋巴细胞。
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1楼 2014-12-20 11:54:47
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2981634763

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zuoyy at 2015-03-04 23:47:23
顶!同问，请大神指教

为什么不买呢？
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3楼2015-03-05 23:25:50
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zuoyy

铜虫 (小有名气)
顶!同问，请大神指教

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2015-03-04 23:47:23
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彭和尚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实还有一种方法吧
无菌操作取出小鼠脾脏，将脾脏放入装有无血清DMEM培养基的无菌玻璃平皿内，取无菌镊子和5ml一次性无菌注射器，注射器吸满培养基后慢慢穿刺脾脏，然后用镊子轻轻夹脾脏，边夹边缓缓推动注射器，用注射器内培养基冲洗脾脏即可得到脾细胞啊。
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4楼2015-03-06 14:18:07
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