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呀咦呦

新虫 (初入文坛)

[求助] 小鼠脾淋巴细胞分离 已有1人参与

我在做小鼠实验,想分离脾脏淋巴细胞,现在提不出细胞啊,请各位大神指点一下,十分感谢。
具体实验操作如下:无菌剥离小鼠脾脏,置于5mL Hanks液中清洗一下,转移至4 mL小鼠脾脏淋巴细胞分离液培养皿中,用两个无菌载玻片的粗糙面对脾脏进行研磨,5分钟内完成,用枪将细胞悬液缓慢冲几次(勿剧烈),经200目尼龙网过滤,放进离心管内,沿离心管壁小心加入1 mL RPMI-1640液,在2000 rpm离心15 min,用移液枪小心吸取两层液面分界线下的细胞层即为淋巴细胞。
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zuoyy

铜虫 (小有名气)

顶!同问,请大神指教

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2015-03-04 23:47:23
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2981634763

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zuoyy at 2015-03-04 23:47:23
顶!同问,请大神指教

为什么不买呢?
3楼2015-03-05 23:25:50
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彭和尚

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

其实还有一种方法吧
无菌操作取出小鼠脾脏,将脾脏放入装有无血清DMEM培养基的无菌玻璃平皿内,取无菌镊子和5ml一次性无菌注射器,注射器吸满培养基后慢慢穿刺脾脏,然后用镊子轻轻夹脾脏,边夹边缓缓推动注射器,用注射器内培养基冲洗脾脏即可得到脾细胞啊。
4楼2015-03-06 14:18:07
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