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会洗澡的鱼

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于固态发酵测定活细胞数的问题。 已有2人参与

各位大神,我用面包酵母发酵甘薯渣,发酵完后想看一下发酵产物中的活细胞数。有没有好办法从发酵物中将酵母细胞分离?我试过过滤法,2.5g的发酵产物(水分70%左右)过滤定容到100ml,过夜才滤完,这样对结果影响太大。然后又试了直接用生理盐水溶解然后测细胞数,但是培养物少了细胞太少,培养物多了杂质又多,不知道大家有什么好方法没有?另外,用1L的锥形瓶固态发酵的时候,厌氧菌用封口膜来封口,好氧菌比如说黑曲霉、米曲霉是用纱布吗?
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mirenox

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+3, 鼓励应助! 2014-12-26 16:40:01
要测活细胞数目:稀释平板法,不用考虑虑渣的影响,将半固体溶解,然后取悬浊液稀释,再取再稀释,个剃度三个平板,有杂菌也可以看的出来的。
如果要活得菌体:抽虑速度比较快,不用担心水太多,抽虑完可以冷冻干燥,以去除水分。一般对菌体活性影响不大。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-12-20 13:41:33
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mirenox

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

对于怎样封口的问题,氧气可以自由穿过封口膜,建议如果是厌氧,封口膜封好后用保鲜膜包几层,密封效果会很好。如果是好氧,封口膜就行,当然纱布更保险,不怕被杵破

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-12-20 13:47:32
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virty76

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以联培养基一起检测麦角固醇含量,或ATP含量。
已经有论文报道了
4楼2014-12-22 13:49:09
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lcmhdd

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mirenox at 2014-12-20 13:47:32
对于怎样封口的问题,氧气可以自由穿过封口膜,建议如果是厌氧,封口膜封好后用保鲜膜包几层,密封效果会很好。如果是好氧,封口膜就行,当然纱布更保险,不怕被杵破

您好,我想请问“封口膜封好后用保鲜膜包几层”,密封效果跟蜡封效果哪个好?还有就是封口膜还有保鲜膜怎么灭菌啊?会因此染菌吗??
5楼2015-01-16 16:59:43
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开尔文273.15

新虫 (初入文坛)

可不可以考虑做个平板计数。取1g发酵物做梯度稀释稀释可以忽略杂质的问题。黑曲霉一般用棉花塞吧。
6楼2015-03-11 14:50:56
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