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lixiaoyi1981荣誉版主 (正式写手)
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5月份疑难问题汇总,请高手解答。
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回答问题16, http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=817853 补充:一般我们电泳时,内槽的电泳液一定是新配置的,外槽的可以用旧的。 根据这个步骤,我们没有跑过那样的胶。 注:我们跑过的蛋白有,表达纯化产物、IgG、一抗、二抗、直接从组织中提取的蛋白等等。 |
18楼2008-08-27 14:42:42
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lixiaoyi1981(金币+10,VIP+0):好详细,第一个“搬城门木头”的人,重奖。谢谢
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顶一下斑斑": 问题 16: 关于PAGE的3个问题 用水、盐、和醇分别提取的植物种子的蛋白 1、有听说溴酚兰点在电极缓冲液中的吗?我一直点在样品里,现在有点在电极缓冲液中的,对其原理和操作,很不明白 答:有这种情况,溴芬兰无论在点样空,还是在buffer 都是一样的原理,都是起到知识的作用, 通常大家都喜欢和样品混合一起点到样孔,但是有些人考虑到 page的胶孔透光性很强,很难点样,何容易串样,所以在整个buffer中加入溴芬兰,这样的效果是的点样井清晰可见. 而且对电泳没有任何影响. 2、胶跑的过程中不直,是怎么回事? 两个问题: 1 胶的pH和电泳buffer的pH 2, 电泳过程产生大量热, 胶表面受热不均匀. 3、跑完洗脱后,发现刚开始进入分离胶的地方,谱带呈栅栏状,再往下就没事了,是怎么回事? 答:没有明白: 既然跑完,那就是溴芬兰到胶底部,你怎么就能看到物质刚到分离胶的位置, 如果你能看到物质的位置,我们就不需要染色了. 图谱栅栏状,最大可能就是TBE有问题,离子强度有问题,或者使用不纯的水. 什么叫下面没事了,不知所云. |

2楼2008-05-20 08:57:48
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3楼2008-05-20 09:03:53
4楼2008-05-22 10:02:52













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