应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双向电泳后银染问题！！！
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 1196  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yeying

金虫 (小有名气)

[交流] 双向电泳后银染问题！！！

本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色。
可是前一段时间我做一样的样品（只是材料的时期不一样）染出了淡黄色，图1。还有的问题就是有图2中有些蛋白点没有好像没有染出来，出现了白点。这是为什么？
Q:如何去除电泳中的横纹？
为什么在碱性端经常会出现Marker一样的拖带（图1）？
请高手指教！
[search]双向电泳[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:16 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2008-05-01 01:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
呵呵，虽然你的问题我不能解答，但是还是要赞一下，图跑的不错，呵呵
赞一下 回复此楼
2楼2008-05-01 01:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeshengxue

图是跑的还可以，横向拖尾可能跟平衡时间短有关
赞一下 回复此楼
3楼2008-05-24 19:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunymor

铁虫 (初入文坛)
本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色。
可是前一段时间我做一样的样品（只是材料的时期不一样）染出了淡黄色，图1。还有的问题就是有图2中有些蛋白点没有好像没有染出来，出现了白点。这是为什么？
Q:如何去除电泳中的横纹？
为什么在碱性端经常会出现Marker一样的拖带（图1）？
请高手指教！

第一感觉是你的样品杂质可能比较多，横纹的出现主要是因为IEF聚焦不充分，碱性区域出现模糊也许是因为你的蛋白提取液里面含有SDS或其他某种去污剂没有除净
拖带可能是你的胶条PH范围比较窄（4-7等）这样在酸性端和碱性端的蛋白质就会在IEF时聚集在电极两端，尤其是> 7的那部分蛋白比较多。跑第二向时候那些聚集的高丰度蛋白就会出现图中的效果。
最好的办法是优化样品制备，样品制备好电泳结果经常是比较好看的
赞一下 回复此楼
4楼2008-05-25 17:34:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asaboy

金虫 (小有名气)
本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色
银染是黑色的才是对的，淡黄色可定义为银染时染色失败！
90%的可能都是水质的原因，实验室的净水机的水质长时间使用不稳定，建议直接购买瓶装的纯静水做银染！
赞一下 回复此楼
5楼2008-05-27 11:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

playboy723

金虫 (正式写手)
染成黑色可能是你的硝酸银被氧化的缘故  可能在你操作过程中或者银氨溶液配置的有问题  问问其他人染液的配方吧
你的第一向聚的很不好   拖尾太严重了   优化一下聚焦条件吧
至于白点  我做的时候也遇到过   原因我也不清楚   可能是盐或者其他什么污染吧  希望有高人能解释一下
赞一下 回复此楼
6楼2008-05-28 19:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)

我来答答

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢回贴交流 7-12 16:05
1.碱性段出现横纹,现在就技术上仍解决不了: DTT 在IEF 电离导致.另一原因是上样量多,也易出现横纹.
2.注意蛋白样品制备,杂质不能有, 否则银染时很容易看到横向\纵向拖尾.
3.平衡时间掌握好,否则也容易出现横向\纵向拖尾
4.银染过程注意器皿的干净,相关试剂配置用超纯水配置
赞一下(6人) 回复此楼
努力的小蜜蜂
7楼2008-06-16 15:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿月浑子

银虫 (小有名气)
我现在 要搞这些东西  心里还有障碍 以前一点都没做过
赞一下 回复此楼
8楼2008-06-30 00:42:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢回贴交流 7-12 16:05
有横纹跟银染没有关系的，这个跟你配胶的质量，跑电泳的条件，还有样品的浓度，上样量等有观！配胶的质量我就不说了，跑电泳的条件一般情况下电流不要太高，太高了可能跑的太快，差别小的蛋白分不开，但以不能太小，太小了热效应太明显，跑出来的条带模糊；样品浓度大上样量多就会出现分不开，就是一片黑糊糊的那种现象，这时可以减少上样量试试
赞一下(6人) 回复此楼
9楼2008-09-03 13:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yeying 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +7 安忆灵 2026-03-22 8/400 2026-03-27 11:46 by sanrepian
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 材料学硕333求调剂 +8 北道巷 2026-03-24 8/400 2026-03-27 10:18 by 我是小康
[考研] 材料学硕，求调剂 6+5 糖葫芦888ll 2026-03-22 10/500 2026-03-27 08:18 by hypershenger
[考研] 材料调剂 +8 匹克i 2026-03-23 8/400 2026-03-27 08:11 by hypershenger
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 333求调剂 +6 wfh030413@ 2026-03-23 6/300 2026-03-26 22:45 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿厦门大学化学学硕307求调剂 +8 y7czhao 2026-03-26 8/400 2026-03-26 19:51 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学 296 求调剂 +4 朵朵- 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:01 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿211 初试270分 求调剂 +6 谷雨上岸 2026-03-23 7/350 2026-03-26 18:55 by 不吃魚的貓
[考研] 279求调剂 +6 红衣隐官 2026-03-21 6/300 2026-03-26 18:32 by 不吃魚的貓
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +17 tcxiaoxx 2026-03-20 19/950 2026-03-26 16:04 by 不吃魚的貓
[考研] 086000生物与医药292求调剂 +6 小小陈小小 2026-03-22 9/450 2026-03-26 15:58 by dick_runner
[考研] 297求调剂 +6 田洪有 2026-03-26 6/300 2026-03-26 15:55 by 不吃魚的貓
[考研] 289材料与化工（085600）B区求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-22 5/250 2026-03-25 08:20 by mx.yue
[考研] 311求调剂 +3 冬十三 2026-03-24 3/150 2026-03-24 21:31 by peike
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 277分求调剂，跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 384求调剂 +3 子系博 2026-03-22 6/300 2026-03-23 21:45 by 子系博
[考研] 336求调剂 +5 rmc8866 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:24 by 学员8dgXkO
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭