应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 双向电泳后银染问题！！！
91/1返回列表
查看: 1385  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

yeying

金虫 (小有名气)

[交流] 双向电泳后银染问题！！！

本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色。
可是前一段时间我做一样的样品（只是材料的时期不一样）染出了淡黄色，图1。还有的问题就是有图2中有些蛋白点没有好像没有染出来，出现了白点。这是为什么？
Q:如何去除电泳中的横纹？
为什么在碱性端经常会出现Marker一样的拖带（图1）？
请高手指教！
[search]双向电泳[/search]

[ Last edited by 350784478 on 2009-7-12 at 09:16 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2008-05-01 01:11:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

taotao4108

金虫 (正式写手)

无理
呵呵，虽然你的问题我不能解答，但是还是要赞一下，图跑的不错，呵呵
赞一下 回复此楼
2楼2008-05-01 01:22:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yeshengxue

图是跑的还可以，横向拖尾可能跟平衡时间短有关
赞一下 回复此楼
3楼2008-05-24 19:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sunymor

铁虫 (初入文坛)
本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色。
可是前一段时间我做一样的样品（只是材料的时期不一样）染出了淡黄色，图1。还有的问题就是有图2中有些蛋白点没有好像没有染出来，出现了白点。这是为什么？
Q:如何去除电泳中的横纹？
为什么在碱性端经常会出现Marker一样的拖带（图1）？
请高手指教！

第一感觉是你的样品杂质可能比较多，横纹的出现主要是因为IEF聚焦不充分，碱性区域出现模糊也许是因为你的蛋白提取液里面含有SDS或其他某种去污剂没有除净
拖带可能是你的胶条PH范围比较窄（4-7等）这样在酸性端和碱性端的蛋白质就会在IEF时聚集在电极两端，尤其是> 7的那部分蛋白比较多。跑第二向时候那些聚集的高丰度蛋白就会出现图中的效果。
最好的办法是优化样品制备，样品制备好电泳结果经常是比较好看的
赞一下 回复此楼
4楼2008-05-25 17:34:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asaboy

金虫 (小有名气)
本人最近做银染时都是染成了图2中的黑色，可是其他同学却是染出了淡黄色
银染是黑色的才是对的，淡黄色可定义为银染时染色失败！
90%的可能都是水质的原因，实验室的净水机的水质长时间使用不稳定，建议直接购买瓶装的纯静水做银染！
赞一下 回复此楼
5楼2008-05-27 11:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

playboy723

金虫 (正式写手)
染成黑色可能是你的硝酸银被氧化的缘故  可能在你操作过程中或者银氨溶液配置的有问题  问问其他人染液的配方吧
你的第一向聚的很不好   拖尾太严重了   优化一下聚焦条件吧
至于白点  我做的时候也遇到过   原因我也不清楚   可能是盐或者其他什么污染吧  希望有高人能解释一下
赞一下 回复此楼
6楼2008-05-28 19:34:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北国佳人

铜虫 (小有名气)

我来答答

★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢回贴交流 7-12 16:05
1.碱性段出现横纹,现在就技术上仍解决不了: DTT 在IEF 电离导致.另一原因是上样量多,也易出现横纹.
2.注意蛋白样品制备,杂质不能有, 否则银染时很容易看到横向\纵向拖尾.
3.平衡时间掌握好,否则也容易出现横向\纵向拖尾
4.银染过程注意器皿的干净,相关试剂配置用超纯水配置
赞一下(6人) 回复此楼
努力的小蜜蜂
7楼2008-06-16 15:44:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿月浑子

银虫 (小有名气)
我现在 要搞这些东西  心里还有障碍 以前一点都没做过
赞一下 回复此楼
8楼2008-06-30 00:42:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)
★
司马诸葛(金币+1,VIP+0):谢谢回贴交流 7-12 16:05
有横纹跟银染没有关系的，这个跟你配胶的质量，跑电泳的条件，还有样品的浓度，上样量等有观！配胶的质量我就不说了，跑电泳的条件一般情况下电流不要太高，太高了可能跑的太快，差别小的蛋白分不开，但以不能太小，太小了热效应太明显，跑出来的条带模糊；样品浓度大上样量多就会出现分不开，就是一片黑糊糊的那种现象，这时可以减少上样量试试
赞一下(6人) 回复此楼
9楼2008-09-03 13:51:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yeying 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 6/300 2026-11-05 18:11 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:58 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 kvewwGtKktqB 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 13/650 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 kvewwGtKktqB 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:47 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 8/400 2026-11-05 17:38 by My20PsvIExYO
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 14/700 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 11/550 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 17:36 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:26 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 19/950 2026-11-05 17:25 by My20PsvIExYO
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ELBZ6WwEaRj6 2026-11-04 7/350 2026-11-05 16:08 by My20PsvIExYO
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:46 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:35 by My20PsvIExYO
[考研] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 15:24 by My20PsvIExYO
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 9/450 2026-11-05 15:13 by My20PsvIExYO
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 ncTVBM6AOJHF 2026-11-04 10/500 2026-11-05 10:39 by PYZmcHr5kSaq
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭