24小时热门版块排行榜    

查看: 1132  |  回复: 9
当前主题已经存档。

jia0472

金虫 (小有名气)

[交流] 发酵液预处理问题

做生物转化实验遇到点问题,在这里向大家请教一下:我想做某一化合物被菌生物转化的动态曲线,在定时取点后,想上液相进行检测,但是我们知道,发酵液里有很多成分,如果不经过预处理,对柱子的损害大,那么预处理需要怎么做呢?另外,因为我是做动态曲线,在每个时间点取样后还有终止反应,即:使菌体内的酶灭活才行。我看到有的资料说离心后上液相,那么离心应该不会终止酶活反应吧,所以我放弃了离心的方法,打算萃取,用的是乙酸乙酯萃的,但是接下来又不知道该怎么做了,原打算取乙酸乙酯萃取液少量,用甲醇稀释,因为流动相是甲醇,样品不溶于甲醇,溶于乙酸乙酯,我还想问就是混有乙酸乙酯的样品能进C18柱吗?会不会还对柱子有损害?
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
沸水让酶失活..然后直接上液相
2楼2008-05-13 17:41:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jia0472

金虫 (小有名气)


reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by chenyyy at 2008-5-13 17:41:
沸水让酶失活..然后直接上液相

不太可取,这样会对样品有影响
3楼2008-05-13 18:02:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qijilaji

金虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
乙酸乙酯萃取之后旋蒸,蒸干之后再加甲醇
4楼2008-06-05 14:43:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenyyy

无虫 (正式写手)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
太麻烦,我们实验室是直接离心上液相的
不过误差肯定比较大
5楼2008-06-29 20:36:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶荷

木虫 (小有名气)

随便说说

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):thx
我想也许可以先酸化一下使酶失活再上柱子吧!
安住自在
6楼2008-07-04 15:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

crayoon

至尊木虫 (职业作家)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
如果酶是胞内的,高速离心后上清液中的酶应该非常少的。另外,你可以试一下,离心后的上清液放置不同时间后测一下产物变化,如果变化可以忽略那这个方法就可以用了。
7楼2008-07-05 08:52:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gudaobo

银虫 (小有名气)

★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by qijilaji at 2008-6-5 14:43:
乙酸乙酯萃取之后旋蒸,蒸干之后再加甲醇

加入甲醇后,振摇尽量让样品溶解,不溶的就不要了,可能是多糖、蛋白质等成分,不是您所要的生物转化的东西。
谋定而后动
8楼2008-07-22 10:46:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengjun1981

木虫 (著名写手)


★ ★ ★
reasonspare(金币+3,VIP+0):谢谢分享,欢迎常来
离心后直接上样根本不可取,因为水中有很多蛋白质,酶,多糖等等.你必需把这些东西沉淀下来,离心取上清.如果是孢内物,你还得把你要得东西提出来.
9楼2008-08-13 09:12:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengjun1981

木虫 (著名写手)


离心后直接上样,你测不准,而且液相柱也用不了几天就会坏.这是常识.
10楼2008-08-13 09:15:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jia0472 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +4 kulium 2026-08-21 5/250 2026-08-21 17:45 by Equinoxhua
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 10/500 2026-08-21 17:32 by chengyan1220
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 人气不行了 +7 fansofjerry 2026-08-21 7/350 2026-08-21 14:13 by Vivilian
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 科研孤儿太难了 +15 我4大白菜 2026-08-20 16/800 2026-08-21 11:07 by yming1319
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见