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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 发酵液预处理问题
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jia0472

金虫 (小有名气)

[交流] 发酵液预处理问题

做生物转化实验遇到点问题，在这里向大家请教一下：我想做某一化合物被菌生物转化的动态曲线，在定时取点后，想上液相进行检测，但是我们知道，发酵液里有很多成分，如果不经过预处理，对柱子的损害大，那么预处理需要怎么做呢？另外，因为我是做动态曲线，在每个时间点取样后还有终止反应，即：使菌体内的酶灭活才行。我看到有的资料说离心后上液相，那么离心应该不会终止酶活反应吧，所以我放弃了离心的方法，打算萃取，用的是乙酸乙酯萃的，但是接下来又不知道该怎么做了，原打算取乙酸乙酯萃取液少量，用甲醇稀释，因为流动相是甲醇，样品不溶于甲醇，溶于乙酸乙酯，我还想问就是混有乙酸乙酯的样品能进C18柱吗？会不会还对柱子有损害？
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1楼 2008-05-13 13:04:56
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qijilaji

金虫 (小有名气)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
乙酸乙酯萃取之后旋蒸，蒸干之后再加甲醇
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4楼2008-06-05 14:43:57
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chenyyy

无虫 (正式写手)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
沸水让酶失活．．然后直接上液相
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2楼2008-05-13 17:41:30
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jia0472

金虫 (小有名气)
★
reasonspare(金币+1,VIP+0):积极交流奖
引用回帖:
Originally posted by chenyyy at 2008-5-13 17:41:
沸水让酶失活．．然后直接上液相

不太可取，这样会对样品有影响
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3楼2008-05-13 18:02:46
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chenyyy

无虫 (正式写手)
★ ★
reasonspare(金币+2,VIP+0):积极交流奖
太麻烦,我们实验室是直接离心上液相的
不过误差肯定比较大
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5楼2008-06-29 20:36:57
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