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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞转染并经稳定筛选后形态发生变化的原因
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mklpumc

木虫 (小有名气)

[交流] 细胞转染并经稳定筛选后形态发生变化的原因

请教各位，我的细胞转染质粒后，用Ｇ４１８进行筛选获得了稳定表达细胞株，但是细胞的形态发生了变化，不知道是什么原因，基本原理吗？向各位请教，谢谢！
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1楼 2008-05-09 16:15:22
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
lixiaoyi1981(金币+0,VIP+0):欢迎常来，看来你在核酸这块很有心得，多多交流
你可以把你的实验说的详细点吗？
我的实验是做的rescue，稳定表达我已经Knockout的蛋白。rescue蛋白稳定表达后，我的细胞形态是有些变化的，但生长是正常的，与我wild type的细胞株生长相似。
但我不知道你的细胞是什么情况，如果细胞生长正常的话，maybe它是个好事情呢，说明你的基因work了。
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位卑未敢忘忧国。
2楼2008-07-14 23:50:38
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xyklmu

至尊木虫 (知名作家)

虫眼看世界
实际上你讲的很不详细，无从分析你的试验结果，比如你用的是什么受体细胞，转的是什么vector，插入了什么基因等。
个人感觉，细胞转染并筛选稳定株之后，会大量表达外源的蛋白，很有可能就是这种蛋白是你的细胞形态改变，正如大肠杆菌大量表达外源蛋白的时候有时也会形成包涵体一样。还有，你的载体一般是要整合到基因组里面去的，才可以稳定表达。插入点也是不定的，插入也许会破坏或者改变插入点附近另一个有功能的基因的表达，通过一些途径而影响细胞的形态。一般来说，你会同时有几个备选的细胞株，可以从中筛选出生长良好形态也较好的稳定株的。

多多交流。
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位卑未敢忘忧国。
3楼2008-07-16 04:24:33
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