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van0735

铁杆木虫 (小有名气)

[交流] 求助!如何将细胞核蛋白和胞浆蛋白分离?

如何使用简便快捷的方法将细胞的核蛋白和胞浆蛋白分离?如果是差速离心,需要哪些试剂?
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ququ_1997

铁虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★
sxdxrhyy(金币+2,VIP+0):鼓励!
van0735(金币+2,VIP+0):谢谢 7-8 13:49
我们采用的是PIERCE的试剂盒,其原理是不同去污剂对胞膜和核膜的裂解能力不同。
即首先采用只裂解胞膜而不破核膜的裂解液,离心取上清得到胞浆蛋白,剩下的沉淀再加第二种裂解液,裂解核膜后离心取上清即为核蛋白。
2楼2008-06-08 16:36:30
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yangbear

★ ★
van0735(金币+2,VIP+0):谢谢 7-8 13:49
一般的方法是先用低浓度的盐和去污剂获得胞浆蛋白。然后用高盐溶液(0.4 M NaCl)提取核蛋白。查 band shift assay or EMSA 可得到详细的方法。
3楼2008-06-23 11:09:32
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xiukuncui

木虫 (正式写手)


van0735(金币+1,VIP+0):谢谢 7-8 13:50
我们用的是普利莱基因技术公司的Nuclear-Cytosol Extraction Kit 效果尚好
4楼2008-06-26 17:05:42
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xueqiao1868

银虫 (小有名气)

同楼上
普利莱的盒子不错,便宜!效果也还不错!
5楼2008-07-16 15:23:05
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