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csbcook

木虫 (小有名气)

[求助] 明胶与考马斯亮蓝的染色问题 已有4人参与

我将0.03g明胶溶到蒸馏水里,完全溶解后,取1ml与5ml考马斯亮蓝溶液反应,20min后用紫外分光光度计595nm检测吸光度,发现完全没有吸收,请教各位到底是什么原因?谢啦
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csbcook

木虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by csbcook at 2014-12-02 08:56:21
谢谢你的大力帮助,我现在面临一个问题希望能请教一下,我们做了一种材料,用明胶和它发生交联反应,现在要测这种材料上连接了多少的明胶,还不能用测剩余凝胶的量来确定。现在不知道怎么办了。那个材料用6M的盐酸 ...

那个材料在120度下,用6M的盐酸反应2h后水解,不知道这个反应条件下明胶会不会也水解完了?
9楼2014-12-02 09:02:32
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
csbcook: 金币+20, 有帮助 2014-12-02 17:33:18
考马斯亮兰有G250和R250两种,测蛋白含量用的是G250,这个不能搞混了。如果用的是G250,会不会是你的明胶浓度太低(1ml明胶浓度没标明),检测不出呢?

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
微信公众号:食安小屋
2楼2014-12-01 15:22:28
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csbcook

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2014-12-01 15:22:28
考马斯亮兰有G250和R250两种,测蛋白含量用的是G250,这个不能搞混了。如果用的是G250,会不会是你的明胶浓度太低(1ml明胶浓度没标明),检测不出呢?

1ml明胶的浓度是1.5mg/ml,用的也是G250,感觉浓度不算低吧,没有吸光度啊就是。还想请教一下,如果将明胶用盐酸水解,那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗?谢谢
3楼2014-12-01 16:48:28
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by csbcook at 2014-12-01 16:48:28
1ml明胶的浓度是1.5mg/ml,用的也是G250,感觉浓度不算低吧,没有吸光度啊就是。还想请教一下,如果将明胶用盐酸水解,那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗?谢谢...

你可以加大浓度试试,多做个实验嘛,也不难,看是不是这个原因。酸水解后的明胶,如果用考马斯亮兰法测,那么测定结果还是蛋白质的残留量,绝不是氨基酸的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
微信公众号:食安小屋
4楼2014-12-01 18:14:56
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