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明胶与考马斯亮蓝的染色问题
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明胶与考马斯亮蓝的染色问题
已有4人参与
我将0.03g明胶溶到蒸馏水里,完全溶解后,取1ml与5ml考马斯亮蓝溶液反应,20min后用紫外分光光度计595nm检测吸光度,发现完全没有吸收,请教各位到底是什么原因?谢啦
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1楼
2014-12-01 11:36:08
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8楼
:
Originally posted by
csbcook
at 2014-12-02 08:56:21
谢谢你的大力帮助,我现在面临一个问题希望能请教一下,我们做了一种材料,用明胶和它发生交联反应,现在要测这种材料上连接了多少的明胶,还不能用测剩余凝胶的量来确定。现在不知道怎么办了。那个材料用6M的盐酸 ...
那个材料在120度下,用6M的盐酸反应2h后水解,不知道这个反应条件下明胶会不会也水解完了?
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9楼
2014-12-02 09:02:32
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2014-12-02 17:33:18
考马斯亮兰有G250和R250两种,测蛋白含量用的是G250,这个不能搞混了。如果用的是G250,会不会是你的明胶浓度太低(1ml明胶浓度没标明),检测不出呢?
[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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2楼
2014-12-01 15:22:28
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2楼
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Originally posted by
99503102
at 2014-12-01 15:22:28
考马斯亮兰有G250和R250两种,测蛋白含量用的是G250,这个不能搞混了。如果用的是G250,会不会是你的明胶浓度太低(1ml明胶浓度没标明),检测不出呢?
1ml明胶的浓度是1.5mg/ml,用的也是G250,感觉浓度不算低吧,没有吸光度啊就是。还想请教一下,如果将明胶用盐酸水解,那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗?谢谢
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2014-12-01 16:48:28
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csbcook
at 2014-12-01 16:48:28
1ml明胶的浓度是1.5mg/ml,用的也是G250,感觉浓度不算低吧,没有吸光度啊就是。还想请教一下,如果将明胶用盐酸水解,那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗?谢谢...
你可以加大浓度试试,多做个实验嘛,也不难,看是不是这个原因。酸水解后的明胶,如果用考马斯亮兰法测,那么测定结果还是蛋白质的残留量,绝不是氨基酸的。
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4楼
2014-12-01 18:14:56
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