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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 明胶与考马斯亮蓝的染色问题
汕头大学海洋科学接受调剂
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csbcook

木虫 (小有名气)

[求助] 明胶与考马斯亮蓝的染色问题 已有4人参与

我将0.03g明胶溶到蒸馏水里，完全溶解后，取1ml与5ml考马斯亮蓝溶液反应，20min后用紫外分光光度计595nm检测吸光度，发现完全没有吸收，请教各位到底是什么原因？谢啦
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1楼 2014-12-01 11:36:08
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csbcook

木虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by csbcook at 2014-12-02 08:56:21
谢谢你的大力帮助，我现在面临一个问题希望能请教一下，我们做了一种材料，用明胶和它发生交联反应，现在要测这种材料上连接了多少的明胶，还不能用测剩余凝胶的量来确定。现在不知道怎么办了。那个材料用6M的盐酸 ...

那个材料在120度下，用6M的盐酸反应2h后水解，不知道这个反应条件下明胶会不会也水解完了？
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9楼2014-12-02 09:02:32
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
csbcook: 金币+20, ★有帮助 2014-12-02 17:33:18
考马斯亮兰有G250和R250两种，测蛋白含量用的是G250，这个不能搞混了。如果用的是G250，会不会是你的明胶浓度太低（1ml明胶浓度没标明），检测不出呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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微信公众号：食安小屋
2楼2014-12-01 15:22:28
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csbcook

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 99503102 at 2014-12-01 15:22:28
考马斯亮兰有G250和R250两种，测蛋白含量用的是G250，这个不能搞混了。如果用的是G250，会不会是你的明胶浓度太低（1ml明胶浓度没标明），检测不出呢？

1ml明胶的浓度是1.5mg/ml，用的也是G250，感觉浓度不算低吧，没有吸光度啊就是。还想请教一下，如果将明胶用盐酸水解，那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗？谢谢
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3楼2014-12-01 16:48:28
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99503102

版主 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by csbcook at 2014-12-01 16:48:28
1ml明胶的浓度是1.5mg/ml，用的也是G250，感觉浓度不算低吧，没有吸光度啊就是。还想请教一下，如果将明胶用盐酸水解，那么水解产生的氨基酸还能用考马斯亮蓝检测吗？谢谢...

你可以加大浓度试试，多做个实验嘛，也不难，看是不是这个原因。酸水解后的明胶，如果用考马斯亮兰法测，那么测定结果还是蛋白质的残留量，绝不是氨基酸的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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微信公众号：食安小屋
4楼2014-12-01 18:14:56
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