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dxy2132334

新虫 (初入文坛)

[求助] 检测波长的确定 已有2人参与

我用水杨酸作为捕捉剂,进行羟基自由基的捕捉,因为水杨酸和羟基自由基反应的主要产物是2,3-二羟基苯甲酸和2,5-二羟基苯甲酸。同时水杨酸的最大吸光度对应波长是303nm左右,2,3-二羟基苯甲酸和2,5-二羟基苯甲酸分别是310nm和329nm左右。如何在做HPLC检测时,确定他们的检测波长?

检测波长的确定
三者的波长图.jpg
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林海君君君

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by klicking at 2014-12-21 19:33:49
个人建议考虑一下:浓度是否太低了?...

水杨酸么?这已经是正常浓度的20倍了。。。。
7楼2014-12-22 13:40:38
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+2, 辛苦了 2014-11-28 15:41:38
dxy2132334: 金币+10, ★★★很有帮助, 可是为什么别人选择的检测波长是296nm处,而不是310nm左右 2014-11-29 08:07:53
其实图中已经很明确了嘛,采用三个光谱的交汇点即可,这样水杨酸和2,5-二羟基苯甲酸虽不在其最大吸收,但因其吸收度强,且水杨酸是主要产物,不会影响其测量,同时兼顾了吸收度最弱的2,3-二羟基苯甲酸。
归零
2楼2014-11-28 09:39:10
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mxy216

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
archbishop: 金币+2, 欢迎常来分析版。 2014-11-28 15:41:52
dxy2132334: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-29 08:04:53
紫外看,可以确定是交叉点的波长,不过计算时要注意了,是采用外标法还是校正因子的,
3楼2014-11-28 10:31:37
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dxy2132334

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by mxy216 at 2014-11-28 10:31:37
紫外看,可以确定是交叉点的波长,不过计算时要注意了,是采用外标法还是校正因子的,

但是为什么我看有的文献检测波长是296nm处,两者相差这么多不影响吗?另外就是不懂您的后半句话,我原想的就是得到标准曲线以后,直接把电解后的水杨酸的产物的峰面积带入标准曲线就完了。这期间要注意什么?麻烦您细说一下 谢谢
4楼2014-11-29 08:07:06
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