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dxy2132334

新虫 (初入文坛)

[求助] 检测波长的确定 已有2人参与

我用水杨酸作为捕捉剂，进行羟基自由基的捕捉，因为水杨酸和羟基自由基反应的主要产物是2,3-二羟基苯甲酸和2,5-二羟基苯甲酸。同时水杨酸的最大吸光度对应波长是303nm左右，2,3-二羟基苯甲酸和2,5-二羟基苯甲酸分别是310nm和329nm左右。如何在做HPLC检测时，确定他们的检测波长？

检测波长的确定
三者的波长图.jpg
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1楼 2014-11-28 09:16:11
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mxy216

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
archbishop: 金币+2, 欢迎常来分析版。 2014-11-28 15:41:52
dxy2132334: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-11-29 08:04:53
紫外看，可以确定是交叉点的波长，不过计算时要注意了，是采用外标法还是校正因子的，
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3楼2014-11-28 10:31:37
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klicking

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
archbishop: 金币+2, 辛苦了 2014-11-28 15:41:38
dxy2132334: 金币+10, ★★★很有帮助, 可是为什么别人选择的检测波长是296nm处，而不是310nm左右 2014-11-29 08:07:53
其实图中已经很明确了嘛，采用三个光谱的交汇点即可，这样水杨酸和2,5-二羟基苯甲酸虽不在其最大吸收，但因其吸收度强，且水杨酸是主要产物，不会影响其测量，同时兼顾了吸收度最弱的2,3-二羟基苯甲酸。
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2楼2014-11-28 09:39:10
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dxy2132334

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by mxy216 at 2014-11-28 10:31:37
紫外看，可以确定是交叉点的波长，不过计算时要注意了，是采用外标法还是校正因子的，

但是为什么我看有的文献检测波长是296nm处，两者相差这么多不影响吗？另外就是不懂您的后半句话，我原想的就是得到标准曲线以后，直接把电解后的水杨酸的产物的峰面积带入标准曲线就完了。这期间要注意什么？麻烦您细说一下 谢谢
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4楼2014-11-29 08:07:06
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林海君君君

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by klicking at 2014-11-28 09:39:10
其实图中已经很明确了嘛，采用三个光谱的交汇点即可，这样水杨酸和2,5-二羟基苯甲酸虽不在其最大吸收，但因其吸收度强，且水杨酸是主要产物，不会影响其测量，同时兼顾了吸收度最弱的2,3-二羟基苯甲酸。

我现在也是正在做用水杨酸捕捉大气中的羟基自由基的毕业论文实验，但不知道什么原因 ，捕捉完的结果在高校液相色谱仪中出不了峰，初步排除了仪器的问题。我的捕捉方法是1g水杨酸+500ml 35%乙醇配成捕捉液，涂于玻片，置于空气中2小时后用35%乙醇洗出，放到色谱仪中测定，色谱仪的流动相是35% PH3.5 乙醇。
      2,5-二羟基苯甲酸的标准波峰是能出来的，但检测样品就是一点峰都没有。
如果你对这方面有认识的话能不能提点一下我？毕业论文做不出来很是急啊！
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5楼2014-12-21 13:43:26
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