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陶盛昌

木虫 (正式写手)

[求助] 多糖上样过凝胶相关问题 已有1人参与

各位虫友,请教几个问题。
       1.请问一下我多糖上样后,未加洗脱液之前,打开泵,让加的样品慢慢吸附到凝胶填料的过程中,为什么柱子上方会有一条裂缝,每次都有这种现象产生噢,请问各位知道是为什么吗?对实验结果有没有影响?该怎么解决?谢谢!裂缝见下图1.2
       2.我的多糖上样后,洗脱后用苯酚硫酸法测吸光度作曲线,同样的上样量,同样的操作手法和同样的条件下,为什么先后两次所测曲线不太一样?两次曲线见下图3,4.趋势都差不多,分了两个多糖片段,但是所洗脱下来的多糖两个片段所接的管数不一样多,请问这是为什么?该怎么解决?后面我收集多糖片段时该按照哪一个曲线收集?有建设应意见的将追加金币,谢谢!

多糖上样过凝胶相关问题
图1.jpg


多糖上样过凝胶相关问题-1
图2.jpg


多糖上样过凝胶相关问题-2
图3.png


多糖上样过凝胶相关问题-3
图片4.jpg
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陶盛昌

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by torekill at 2014-11-19 17:04:36
没看出有什么裂缝啊,柱头的一点裂缝关系应该不大

苯酚硫酸法的重现性一般,你这两个组分似乎没怎么分开,就按照各自的洗脱曲线来接吧

先谢谢应助!是有裂缝的,只是比较小。关于你说的两个组分没怎么分开,是不是会对后面的结果有较大的影响,还有该如何使他更好地分开呢(这个是重点)?测过吸光度的,成分是可以按照所测的曲线来分开。但是后面不可能每次上样洗脱后都测吸光度的,后面洗脱的该如何分开?虚心求教,再次感谢!
@@@@@@
3楼2014-11-19 20:03:14
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
陶盛昌: 金币+5 2014-11-19 19:57:38
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-19 22:27:38
陶盛昌: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-20 18:28:17
没看出有什么裂缝啊,柱头的一点裂缝关系应该不大

苯酚硫酸法的重现性一般,你这两个组分似乎没怎么分开,就按照各自的洗脱曲线来接吧
2楼2014-11-19 17:04:36
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 陶盛昌 at 2014-11-19 20:03:14
先谢谢应助!是有裂缝的,只是比较小。关于你说的两个组分没怎么分开,是不是会对后面的结果有较大的影响,还有该如何使他更好地分开呢(这个是重点)?测过吸光度的,成分是可以按照所测的曲线来分开。但是后面不 ...

分子筛凝胶柱的分离机制很简单,想分开只要柱子高一点就行了,尽量用细长的柱子,高度80cm以上,上样体积小一点,流速低一些。

如果分得很开的话,可以不测吸光度,直接收集
4楼2014-11-20 08:51:17
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