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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 常压洗脱凝胶柱流速越来越慢？大家遇见过这种情况吗？
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崔宁

新虫 (小有名气)

[求助] 常压洗脱凝胶柱流速越来越慢？大家遇见过这种情况吗？

我现在正在做多糖的分离纯化，昨天上样自己装填的sephadexG200，通宵接洗脱组分，可是发现流速变得越来越慢，是不是哪里堵了还是正常情况？很是费解！向大家求助！
上样之前的流速0.21ml/min,上样后流速一开始有0.14ml/min，现在大约有0.06ml/min吧！慢了很多，加急求助！
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1楼2012-05-01 06:40:51
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trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
崔宁: 金币+2, ★有帮助 2012-05-02 13:20:41
大分子是从凝胶间隙随液体流出，流速较小分子块！装柱时一定要将凝胶搅匀在倒，否则会出现分层。给你个资料看看，或许有用。
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任重道远……
6楼2012-05-02 10:20:58
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崔宁

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by danbomingyue at 2012-05-07 16:01:09:
我认为你可能弄错了，0.1Mpa=10bar,其耐压已经不错了。一般都是3bar左右。

我想纠正一下，0.1mpa=1bar，所以我的填料不是很耐压，现在买了superdex,想换着试一试。谢谢你！！
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21楼2012-05-09 20:00:44
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普通回帖

trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
是不是柱子被碰到了，出现了分层
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任重道远……
2楼2012-05-01 14:43:48
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
多糖的分子量太大就会堵塞凝胶内部孔径
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-05-02 00:03:51
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崔宁

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by trizol11 at 2012-05-01 14:43:48:
是不是柱子被碰到了，出现了分层

我装的柱子没上样之前就有分层，不过我实在是没办法了，反复装了好几次每次都不能达到一点分层也没有。你说的柱子被碰了出现分层是指装好柱子后的碰撞导致柱子分层吗？上样后柱子没有被碰撞。还有他会影响流速吗？非常感谢您的回复！
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4楼2012-05-02 08:20:00
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崔宁

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-02 00:03:51:
多糖的分子量太大就会堵塞凝胶内部孔径

我是一个新手，有这样的疑惑：如果是由于多糖太大堵塞了凝胶内部孔径，是不是应该不会影响到流速那？流动相可以走外水体积部分呀？我问的问题如果比较低级，还请大侠见谅。
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5楼2012-05-02 08:26:50
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崔宁

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by trizol11 at 2012-05-02 10:20:58:
大分子是从凝胶间隙随液体流出，流速较小分子块！装柱时一定要将凝胶搅匀在倒，否则会出现分层。给你个资料看看，或许有用。

非常感谢！!
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7楼2012-05-02 13:20:19
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
引用回帖:
5楼: Originally posted by 崔宁 at 2012-05-02 08:26:50:
我是一个新手，有这样的疑惑：如果是由于多糖太大堵塞了凝胶内部孔径，是不是应该不会影响到流速那？流动相可以走外水体积部分呀？我问的问题如果比较低级，还请大侠见谅。

外水体积最多也就三分之一，而且水压着多了久了也是会堵的。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2012-05-02 19:29:21
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崔宁

新虫 (小有名气)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-02 19:29:21:
外水体积最多也就三分之一，而且水压着多了久了也是会堵的。

哦，明白了，请问如果真的堵了，有神魔方法解决吗？超超声抽滤一下可以吗？或者用神魔溶剂处理一下？非常感谢！！
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9楼2012-05-03 10:45:55
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶
堵了之后试着重装一下，反正你的也不是预装柱。
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崔宁
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10楼2012-05-03 17:49:09
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