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崔宁

新虫 (小有名气)

[求助] 常压洗脱凝胶柱流速越来越慢?大家遇见过这种情况吗?

我现在正在做多糖的分离纯化,昨天上样自己装填的sephadexG200,通宵接洗脱组分,可是发现流速变得越来越慢,是不是哪里堵了还是正常情况?很是费解!向大家求助!
上样之前的流速0.21ml/min,上样后流速一开始有0.14ml/min,现在大约有0.06ml/min吧!慢了很多,加急求助!
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trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
崔宁: 金币+2, ★有帮助 2012-05-02 13:20:41
大分子是从凝胶间隙随液体流出,流速较小分子块!装柱时一定要将凝胶搅匀在倒,否则会出现分层。给你个资料看看,或许有用。
任重道远……
6楼2012-05-02 10:20:58
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崔宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
18楼: Originally posted by danbomingyue at 2012-05-07 16:01:09:
我认为你可能弄错了,0.1Mpa=10bar,其耐压已经不错了。一般都是3bar左右。

我想纠正一下,0.1mpa=1bar,所以我的填料不是很耐压,现在买了superdex,想换着试一试。谢谢你!!
21楼2012-05-09 20:00:44
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普通回帖

trizol11

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
是不是柱子被碰到了,出现了分层
任重道远……
2楼2012-05-01 14:43:48
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

多糖的分子量太大就会堵塞凝胶内部孔径
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2012-05-02 00:03:51
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崔宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by trizol11 at 2012-05-01 14:43:48:
是不是柱子被碰到了,出现了分层

我装的柱子没上样之前就有分层,不过我实在是没办法了,反复装了好几次每次都不能达到一点分层也没有。你说的柱子被碰了出现分层是指装好柱子后的碰撞导致柱子分层吗?上样后柱子没有被碰撞。还有他会影响流速吗?非常感谢您的回复!
4楼2012-05-02 08:20:00
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崔宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-02 00:03:51:
多糖的分子量太大就会堵塞凝胶内部孔径

我是一个新手,有这样的疑惑:如果是由于多糖太大堵塞了凝胶内部孔径,是不是应该不会影响到流速那?流动相可以走外水体积部分呀?我问的问题如果比较低级,还请大侠见谅。
5楼2012-05-02 08:26:50
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崔宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by trizol11 at 2012-05-02 10:20:58:
大分子是从凝胶间隙随液体流出,流速较小分子块!装柱时一定要将凝胶搅匀在倒,否则会出现分层。给你个资料看看,或许有用。

非常感谢!!
7楼2012-05-02 13:20:19
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

引用回帖:
5楼: Originally posted by 崔宁 at 2012-05-02 08:26:50:
我是一个新手,有这样的疑惑:如果是由于多糖太大堵塞了凝胶内部孔径,是不是应该不会影响到流速那?流动相可以走外水体积部分呀?我问的问题如果比较低级,还请大侠见谅。

外水体积最多也就三分之一,而且水压着多了久了也是会堵的。
流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
8楼2012-05-02 19:29:21
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崔宁

新虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2012-05-02 19:29:21:
外水体积最多也就三分之一,而且水压着多了久了也是会堵的。

哦,明白了,请问如果真的堵了,有神魔方法解决吗?超超声抽滤一下可以吗?或者用神魔溶剂处理一下?非常感谢!!
9楼2012-05-03 10:45:55
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

堵了之后试着重装一下,反正你的也不是预装柱。

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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
10楼2012-05-03 17:49:09
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