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panyilin

铜虫 (小有名气)

[交流] 请问葡聚糖凝胶要如何处理装柱啊 已有9人参与

各位同仁,请问葡聚糖凝胶要如何处理装柱啊????
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kedaxyn

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 14:42:48
凝胶成本贵,所以要小心一点。先检查柱子是否完好,在塞上一点棉花,加点溶剂看看流速如何,从而判断棉花塞的松紧是否合适。然后用溶剂溶解凝胶,充分搅拌到无气泡,拿玻璃棒引流,沿着管壁倾倒下去。倒的过程要用玻璃棒搅拌一下,速度尽量快。静置,若表面不平整,可以用洗耳球轻敲管壁。小心不能让凝胶柱干了。
认真过好每一天
4楼2012-12-07 00:25:15
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西安事变

木虫 (职业作家)

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karl2100: 金币+1, 谢谢回帖! 2012-12-07 23:49:47
葡聚糖凝胶也分好多种的。如果是LH-20,使用有机溶剂例如甲醇或丙酮洗脱的,应该首先用溶剂充分浸泡凝胶,玻璃棒轻轻搅动均匀(尽量不要摩擦容器壁),然后迅速倾倒进色谱柱中,必须是一次完成,然后打开活塞,调节流速,让溶剂流出,同时让凝胶沉降均匀,千万小心不能让上方的溶剂流光了。补充溶剂时务必轻轻加入,避免激起凝胶柱面。等到凝胶柱面稳定、不再下降,基本上就可以上样过柱了。如果不小心让柱子上方的溶剂流光了,天也塌不下来,或者用溶剂把凝胶悬浮、倒出来,重新装柱,或者重新“摇柱子”,就是在色谱柱内,用溶剂重新浸泡、悬浮凝胶,重新沉降。所以凝胶用的色谱柱,最好是上端有标准磨口的,可以加一个大体积的“加液球”,平时可以储存洗脱溶剂,摇柱子时候可以有足够的回旋体积。
8楼2012-12-07 23:44:59
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拂晓晨风

木虫 (正式写手)

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 21:46:57
看你这个葡聚糖凝胶是分离什么物质的,如果是分离一些大分子物质的话,就要在用醇处理凝胶之后再用水将醇冲掉才能装柱。
7楼2012-12-07 21:19:24
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拂晓晨风

木虫 (正式写手)

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karl2100: 金币+1, 3Q 2012-12-11 00:12:40
我原来用葡聚糖凝胶柱是分离多糖这种极性很大的物质,是直接用水或缓冲液洗脱,没有加甲醇。因为加醇类溶剂的话我要的物质就会析出。所以在处理的时候,我们也是要将处理液中的醇冲洗干净。
10楼2012-12-10 21:56:53
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普通回帖

raulsam1984

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 14:42:40
湿法装柱的话,就把凝胶用甲醇或者乙醇泡着,然后倒进柱子里,用玻棒搅一下,怕有气泡,待它平整就好。不要让凝胶干了。
2楼2012-12-06 11:10:05
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allen.tsui

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 14:42:44
我刚装了一根,到415看看吧
3楼2012-12-06 20:43:18
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zxcvb205

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 14:42:52
有专门的装柱器的,配合使用装柱效果会好很多。
5楼2012-12-07 09:58:40
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tongliwoai

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xiaoxiao270: 金币+1 2012-12-07 14:42:55
有筛板的最好 没筛板的用棉花也可以 楼上虫友说的比较详细了
春有百花秋有月,夏有凉风冬有雪,若无闲事挂心头,便是人间好时节
6楼2012-12-07 13:38:49
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panyilin

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 拂晓晨风 at 2012-12-07 21:19:24
看你这个葡聚糖凝胶是分离什么物质的,如果是分离一些大分子物质的话,就要在用醇处理凝胶之后再用水将醇冲掉才能装柱。

如果大极性物质,是不是要用水-甲醇洗脱啦
9楼2012-12-10 21:46:28
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