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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 多糖上样过凝胶相关问题
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陶盛昌

木虫 (正式写手)

[求助] 多糖上样过凝胶相关问题 已有1人参与

各位虫友，请教几个问题。
       1.请问一下我多糖上样后，未加洗脱液之前，打开泵，让加的样品慢慢吸附到凝胶填料的过程中，为什么柱子上方会有一条裂缝，每次都有这种现象产生噢，请问各位知道是为什么吗？对实验结果有没有影响？该怎么解决？谢谢！裂缝见下图1.2
       2.我的多糖上样后，洗脱后用苯酚硫酸法测吸光度作曲线，同样的上样量，同样的操作手法和同样的条件下，为什么先后两次所测曲线不太一样？两次曲线见下图3,4.趋势都差不多，分了两个多糖片段，但是所洗脱下来的多糖两个片段所接的管数不一样多，请问这是为什么？该怎么解决？后面我收集多糖片段时该按照哪一个曲线收集？有建设应意见的将追加金币，谢谢！

多糖上样过凝胶相关问题
图1.jpg


多糖上样过凝胶相关问题-1
图2.jpg


多糖上样过凝胶相关问题-2
图3.png


多糖上样过凝胶相关问题-3
图片4.jpg
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@@@@@@
1楼 2014-11-19 11:34:23
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
陶盛昌: 金币+5 2014-11-19 19:57:38
xiaoxiao270: 金币+1, 3Q 2014-11-19 22:27:38
陶盛昌: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-11-20 18:28:17
没看出有什么裂缝啊，柱头的一点裂缝关系应该不大

苯酚硫酸法的重现性一般，你这两个组分似乎没怎么分开，就按照各自的洗脱曲线来接吧
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2楼2014-11-19 17:04:36
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陶盛昌

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by torekill at 2014-11-19 17:04:36
没看出有什么裂缝啊，柱头的一点裂缝关系应该不大

苯酚硫酸法的重现性一般，你这两个组分似乎没怎么分开，就按照各自的洗脱曲线来接吧

先谢谢应助！是有裂缝的，只是比较小。关于你说的两个组分没怎么分开，是不是会对后面的结果有较大的影响，还有该如何使他更好地分开呢（这个是重点）？测过吸光度的，成分是可以按照所测的曲线来分开。但是后面不可能每次上样洗脱后都测吸光度的，后面洗脱的该如何分开？虚心求教，再次感谢！
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@@@@@@
3楼2014-11-19 20:03:14
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torekill

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陶盛昌 at 2014-11-19 20:03:14
先谢谢应助！是有裂缝的，只是比较小。关于你说的两个组分没怎么分开，是不是会对后面的结果有较大的影响，还有该如何使他更好地分开呢（这个是重点）？测过吸光度的，成分是可以按照所测的曲线来分开。但是后面不 ...

分子筛凝胶柱的分离机制很简单，想分开只要柱子高一点就行了，尽量用细长的柱子，高度80cm以上，上样体积小一点，流速低一些。

如果分得很开的话，可以不测吸光度，直接收集
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4楼2014-11-20 08:51:17
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