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疯狂的bamboo

铜虫 (小有名气)

[求助] elisa的试验问题 已有1人参与

因为做免疫学试验,通过抗原的注射,需要测抗体效价,分三组:空白组(PBST);阴性对照(做实验的时候设的对照),测定组(实验组)基本步骤是:抗原的包被,5ug/ml,每孔100u,稀释血清加入(1:10,1:100^1:1000000)孵育,二抗加入(1:1000),结果发现,在低稀释度的时候,显示阴性,而在1:10000和1:100000的时候显示阳性,1:1000000的时候恢复阴性(我是通过OD值的比值判断的),为什么低稀释度的时候反而显示的是阴性的???为什么阴性对照OD值那么高的?附上部分实验数据:
         PBST:0.163        0.104        0.102        0.130        0.090        0.219
        阴性对照:0.907        1.269        0.956        0.584        0.314        0.309
          测定组: 1.485            1.702       1.617         1.335         0.834      0.454
BB不多 大哥大姐们求帮帮忙
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livein合肥

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
疯狂的bamboo: 金币+5, 有帮助 2014-12-19 06:56:15
你包被的ELISA板有没有封闭?免疫的抗原有没有偶联?你这个阴性对照是未免疫老鼠的血清还是免疫空载体的老鼠血清?
2楼2014-12-18 15:30:59
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