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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » lipo 2000转染问题
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赵华翔

新虫 (初入文坛)

[求助] lipo 2000转染问题 已有2人参与

各位战友，准备用lipo 2000转染MC3T3细胞，看新版lipo的说明书，说可以直接把lipo复合物滴到medium，无所谓有无血清和抗生素，是这样吗？我上次转了一次，效率比较低（不过当时用的是半量的lipo）。想请教各位老版说明书上说在转染前一天用带有血清的无抗生素培养基培养到底是什么用？我今天已经把细胞分好（用的是完全培养基），估计明天转，需要在转之前换上其它的培养基吗？
另外，那个复合物是怎么加到medium里的啊？我的一个师兄和我说，不要用滴的，会把细胞吹起来，增加细胞死亡，可是感觉沿壁加入会不会在壁上损失太多啊？还是像加刺激那样，把枪头轻轻申到medium里，慢慢打出去？
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1楼 2014-11-09 21:43:15
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-11-11 22:07:22
lip2000转染的时候可以用opti-MEM培养基，可以一定程度提高转染效率。最好不加血清，这样效率高一些，但是对于细胞的伤害性也比较大，四小时要换液。使用lip-2000时操作尽量轻柔哎！
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2014-11-11 16:53:20
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ysk1989

新虫 (小有名气)
脂质体转染的劣势越明显，许多细胞都转不进去，成为许多科研工作者的一大障碍。英格恩生物转染试剂的出现无疑是转染试剂领域的重大突破，纳米聚合物材料，细胞毒性低，转染效率高，远远超越脂质体，为科研工作者带来了极大的便捷。英格恩生物的转染试剂可以转染包括原代细胞、悬浮细胞和敏感细胞在内的所有难转染细胞，效果十分明显。
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3楼2016-07-29 13:16:34
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

应该是无血清培养基啊，血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合，并且影响转染效率；平时我们做细胞转染实验的时候用来稀释siRNA和RFECT的培养基都是无血清培养基，转染后48h收细胞做qPCR基因水平检测
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4楼2019-03-01 15:21:38
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