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jiankang87新虫 (初入文坛)
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[求助]
急求!!各位大侠,关于转染到动物身上的质粒有何要求? 已有2人参与
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我最近两次提取了pGFP(绿色荧光蛋白)质粒,目的是将其与一种纳米载体相结合,然后注入到裸小鼠体内,我采用的是天根的去内毒素的质粒大提试剂盒,目前已经提过两次,OD260/280检测均在1.8以上。按照试剂盒要求,最后一步洗脱质粒DNA我是在超净台内采用的无菌双蒸水。今天我同学和我说,必须先在细胞层面试一试,看看是否有污染,还要进行下电泳测试,看看提取的是否是需要的那种质粒。我不太明白 1.整个提取质粒过程,除了最后一步是在超净台里操作的,前面的都是在空气中操作的,那么请问这样如何可以保证绝对无菌? 2.如何确定是否目前提出来的就是我需要的那种质粒? 3.直接注射到裸鼠体内的质粒有何要求?在目前提取后还需要进行什么特殊处理吗? 实验非常着急,请各位大侠不吝赐教啊。 |
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