应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 急求!!各位大侠，关于转染到动物身上的质粒有何要求？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
31/1返回列表
查看: 2511  |  回复: 2
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

jiankang87

新虫 (初入文坛)

[求助] 急求!!各位大侠，关于转染到动物身上的质粒有何要求？ 已有2人参与

我最近两次提取了pGFP（绿色荧光蛋白）质粒，目的是将其与一种纳米载体相结合，然后注入到裸小鼠体内，我采用的是天根的去内毒素的质粒大提试剂盒，目前已经提过两次，OD260/280检测均在1.8以上。按照试剂盒要求，最后一步洗脱质粒DNA我是在超净台内采用的无菌双蒸水。今天我同学和我说，必须先在细胞层面试一试，看看是否有污染，还要进行下电泳测试，看看提取的是否是需要的那种质粒。我不太明白
1.整个提取质粒过程，除了最后一步是在超净台里操作的，前面的都是在空气中操作的，那么请问这样如何可以保证绝对无菌？
2.如何确定是否目前提出来的就是我需要的那种质粒？
3.直接注射到裸鼠体内的质粒有何要求？在目前提取后还需要进行什么特殊处理吗？
实验非常着急，请各位大侠不吝赐教啊。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
上帝保佑我
1楼 2014-11-05 21:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2014-11-05 23:05:10
无菌的话过0.22um的膜

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-11-05 21:01:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Never 漂流

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

1，确定是否是要的质粒？
通过你的对你质粒上的位点进行酶切进行琼脂糖跑胶分子量鉴定。具体使用酶搜索你的质粒。
2，质粒转染动物要与lip2000等形成复合物后转染。
赞一下 回复此楼
3楼2016-03-30 13:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 jiankang87 的主题更新
31/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 333求调剂 +7 87639 2026-03-21 12/600 2026-03-26 22:08 by 不吃魚的貓
[考研] 294分080500材料科学与工程求调剂 +4 柳溪边 2026-03-26 4/200 2026-03-26 21:14 by XPU李庆
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 20:33 by cy128
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +4 钢铁大炮 2026-03-24 4/200 2026-03-26 16:28 by dick_runner
[考研] 一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂 +9 稻妻小编 2026-03-26 9/450 2026-03-26 16:16 by 不吃魚的貓
[考研] 275求调剂 +9 Micky11223 2026-03-25 11/550 2026-03-26 15:54 by 不吃魚的貓
[考研] 0856求调剂 +8 zhn03 2026-03-25 9/450 2026-03-26 13:42 by zzll406
[材料工程] 一志愿C9材料与化工专业总分300求调剂 +5 曼111 2026-03-24 6/300 2026-03-26 13:04 by 13756423260
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 0854人工智能方向招收调剂 +4 章小鱼567 2026-03-24 4/200 2026-03-25 13:29 by 2177681040
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 284求调剂 +3 yanzhixue111 2026-03-23 6/300 2026-03-23 22:58 by pswait
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
[考研] 315分，诚求调剂，材料与化工085600 +3 13756423260 2026-03-22 3/150 2026-03-22 20:11 by edmund7
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 求调剂 +5 Zhangbod 2026-03-21 7/350 2026-03-22 13:13 by Zhangbod
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭