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RNA稀释浓度变化不大，od比值变好问题
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最近提RNA（trizol法提真菌RNA）浓度老是在700左右，260/280比值在1.2左右。今天又做了一回还是这样，突发奇想多加一点水稀释一下。原来是加20ul溶解，结果浓度是700左右，260/280比值在1.2左右，260/230在1.4左右；然后又加了20ul水，总量40ul，浓度基本没变，260/280比值上升到1.4左右，260/230是1.6左右；然后我又加了40ul水，总量80ul，这下浓度变为450左右，260/280比值>1.8，260/230在2.1左右。 原来跑电泳有拖尾现象，这一次还没跑电泳，不知道情况怎么样，电泳图随后补上。请问各位大神怎么回事呀~~ 跑完胶了，图就不上了，那叫一个惨不忍睹。除了蛋白质杂质就没别的东西了，RNA基本全部降解。 那么问题来了~~ 为什么稀释之后比值数据挺好的？？？ 请求帮助，快纠结死我了。 我自己想的是不是样品放多了（基本是用药匙放两到三勺），裂解不充分？ 吸上清的时候很小心了，是用的200枪头两次吸取，如果用氯仿萃取两遍，那么第二遍萃取是不是RNA容易降解？？？ |
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