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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 生物化学 » 请问我想研究一种分子抑制何种酶，该怎么做？
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gendalf

金虫 (著名写手)

[求助] 请问我想研究一种分子抑制何种酶，该怎么做？ 已有1人参与

细胞内有各种组蛋白去乙酰化酶，有HDAC1~11等，我现在手头有一种分子，能抑制组蛋白去乙酰化酶，但不知道这个分子具体抑制哪种组蛋白去乙酰化酶，请问我该如何设计实验？
我通过分子对接和分子模拟研究理论上抑制了哪种酶，现在想通过实验验证。
这些酶市场上买不到，细胞中含量也很低，不可能分离纯化。RNA干扰我现在没条件做。最好RT-PCR或WB等常规手段能做就好了。
谢谢！
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1楼 2014-10-27 17:37:40
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gendalf

金虫 (著名写手)
补充：我想做的是抑制了哪种酶的活性，而不是抑制酶的表达。
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2楼2014-10-27 17:40:36
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wyangdao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-27 23:59:22
gendalf: 金币+30, ★★★很有帮助, 10 2014-12-18 15:06:10
使用RT-PCR技术，获得每个的酶的纯品，然后进行单一性试验，最终确定对于哪一种酶抑制效果较好，一般的情况下，都会有抑制性的，不是只对于单一的某个酶有效果！建议你多看看这方便的文献，再去做试验。
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3楼2014-10-27 18:43:18
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gendalf

金虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wyangdao at 2014-10-27 18:43:18
使用RT-PCR技术，获得每个的酶的纯品，然后进行单一性试验，最终确定对于哪一种酶抑制效果较好，一般的情况下，都会有抑制性的，不是只对于单一的某个酶有效果！建议你多看看这方便的文献，再去做试验。

谢谢您的解答！您说的很对，应该对几个酶都有抑制活性，不过用RT-PCR技术获得酶的纯品似乎太过复杂了，是不是也没有其他什么好办法了。我没有找到这方面的文献。
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4楼2014-10-27 19:47:31
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wyangdao

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gendalf at 2014-10-27 19:47:31
谢谢您的解答！您说的很对，应该对几个酶都有抑制活性，不过用RT-PCR技术获得酶的纯品似乎太过复杂了，是不是也没有其他什么好办法了。我没有找到这方面的文献。...

暂时想不出其他的方法了
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5楼2014-10-27 23:37:09
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HJ-fight
6楼2014-10-28 09:12:22
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xipha

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wyangdao at 2014-10-27 18:43:18
使用RT-PCR技术，获得每个的酶的纯品，然后进行单一性试验，最终确定对于哪一种酶抑制效果较好，一般的情况下，都会有抑制性的，不是只对于单一的某个酶有效果！建议你多看看这方便的文献，再去做试验。

你好, 请教一下, 怎样用RT PCR获得酶的纯品?
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7楼2014-10-29 00:41:52
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果果gxl2013

金虫 (小有名气)
我现在和楼主的问题基本一致。不知道楼主现在进行的怎么样了？
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8楼2014-11-23 18:16:38
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