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gendalf

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[求助] 请问我想研究一种分子抑制何种酶，该怎么做？已有1人参与

细胞内有各种组蛋白去乙酰化酶，有HDAC1~11等，我现在手头有一种分子，能抑制组蛋白去乙酰化酶，但不知道这个分子具体抑制哪种组蛋白去乙酰化酶，请问我该如何设计实验？
我通过分子对接和分子模拟研究理论上抑制了哪种酶，现在想通过实验验证。
这些酶市场上买不到，细胞中含量也很低，不可能分离纯化。RNA干扰我现在没条件做。最好RT-PCR或WB等常规手段能做就好了。
谢谢！

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1楼 2014-10-27 17:37:40

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gendalf

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补充：我想做的是抑制了哪种酶的活性，而不是抑制酶的表达。

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2楼2014-10-27 17:40:36

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wyangdao

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-10-27 23:59:22
gendalf: 金币+30, ★★★很有帮助, 10 2014-12-18 15:06:10

使用RT-PCR技术，获得每个的酶的纯品，然后进行单一性试验，最终确定对于哪一种酶抑制效果较好，一般的情况下，都会有抑制性的，不是只对于单一的某个酶有效果！建议你多看看这方便的文献，再去做试验。

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3楼2014-10-27 18:43:18

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gendalf

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引用回帖:

3楼: Originally posted by wyangdao at 2014-10-27 18:43:18
使用RT-PCR技术，获得每个的酶的纯品，然后进行单一性试验，最终确定对于哪一种酶抑制效果较好，一般的情况下，都会有抑制性的，不是只对于单一的某个酶有效果！建议你多看看这方便的文献，再去做试验。

谢谢您的解答！您说的很对，应该对几个酶都有抑制活性，不过用RT-PCR技术获得酶的纯品似乎太过复杂了，是不是也没有其他什么好办法了。我没有找到这方面的文献。

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4楼2014-10-27 19:47:31

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