应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 分子生理 » 关于提取植物组织总RNA的问题
81/1返回列表
查看: 2260  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

L-木木

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于提取植物组织总RNA的问题 已有1人参与

我们已经trizol法提取RNA近两个月了，还是没有成功。具体的步骤都很注意了，用的全部都是灭RNA酶的工具，但就是不知道问题出在哪里，跑胶老是跑不出来。
我们使用的植物叶片是经过较长时间的储存的（四个月左右，在-20度的冰箱），不知道这是不是导致实验失败的原因？
我看很多地方都强调加trizol之前要注意不能解冻。可是实际操作的时候，用液氮研磨后，装进离心管的过程中怎么才能保证始终处于低温呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-19 13:43:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

86553117

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
L-木木(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-12-26 20:22:35
样品已经废掉了，-20储存是不行的，况且4个月了，降解没了，液氮中或-80存可，呵呵
赞一下 回复此楼
2楼2014-12-09 21:23:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

86553117

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

还有第二个问题，刚看到，样品研磨时一定要快速，同时将准备盛装粉末的离心管液氮中冻透后，盛满液氮正放于支架上，粉末研好后，管子也低温(剩余液氮倒掉即可)，正好搭配，我是这么干的，呵呵，挺实用。
赞一下 回复此楼
3楼2014-12-09 21:27:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ncuhxm

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 86553117 at 2014-12-09 21:27:10
还有第二个问题，刚看到，样品研磨时一定要快速，同时将准备盛装粉末的离心管液氮中冻透后，盛满液氮正放于支架上，粉末研好后，管子也低温(剩余液氮倒掉即可)，正好搭配，我是这么干的，呵呵，挺实用。

请问你怎么把你研磨好的样品加到管子里去？
赞一下 回复此楼
4楼2014-12-26 19:16:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

86553117

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by ncuhxm at 2014-12-26 19:16:03
请问你怎么把你研磨好的样品加到管子里去？...

研磨好之后，用不锈钢药匙转移进去的，一般盛2下就够量了，呵呵
赞一下 回复此楼
5楼2014-12-28 16:42:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

骑象人2014

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 86553117 at 2014-12-28 16:42:16
研磨好之后，用不锈钢药匙转移进去的，一般盛2下就够量了，呵呵...

请问你的液氮是怎么加到离心管中去的？用镊子夹着离心管舀的吗？
可以先加TRIzol在离心管中，粉末就加进TRIzol中，RNA应该不会降解吧，没有必要连离心管都冻吧？
赞一下 回复此楼
6楼2015-01-05 21:14:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

86553117

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 骑象人2014 at 2015-01-05 21:14:05
请问你的液氮是怎么加到离心管中去的？用镊子夹着离心管舀的吗？
可以先加TRIzol在离心管中，粉末就加进TRIzol中，RNA应该不会降解吧，没有必要连离心管都冻吧？...

将离心管开盖子后直接扔入泡沫盒的液氮中，冻透后用镊子直接舀出来即可，放置于双面板上，开始磨样，完后，将离心管中的剩余液氮倒掉，开始转移粉末至离心管中，当然你提到的先加trizol，再转移粉末也是可以的，这两种方法我都用过，效果都不错，只是第一种中一定要将液氮倒掉后再转移粉末，否则加trizol后易迸溅，危险，呵呵
赞一下 回复此楼
7楼2015-01-06 19:41:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

骑象人2014

铁虫 (初入文坛)
8楼2015-01-07 09:54:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 L-木木 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭