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joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] RNAiso plus / Trizol 提取细菌总RNA疑问 已有1人参与

大家好,
Sample Text买了takara的RNAiso plus,提取感染的植物组织没有问题,但是提取纯培养的细菌(液体培养基)的RNA时却很不顺利。之前没有任何经验,查了一些资料,还是有很多疑问,在此请教大家:

1.菌体(革兰氏阴性菌)需不需要提前破壁?我查到的文献和方法介绍,都是收集完菌体直接加RNAiso plus。但是查到用柱式试剂盒的方法里都有溶菌酶处理这一步。
2.菌体量和RNAiso plus用量的比例是多少比较合适?按细菌细胞数对应还是按菌体湿重对应?10的9次方菌还是100mg湿菌体对应1ml RNAiso plus?产量如何?

望有实际经验的虫友不吝赐教!谢谢
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

没有必要去专门破壁的,对结果影响不大哎!我们一般都是根据经验加Trizol,不过按照菌体重量进行换算更好一些……
他日扬翼九万里,历大千世界,定我红尘心!
2楼2014-10-21 17:46:46
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