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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » RNAiso plus / Trizol 提取细菌总RNA疑问
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joyjane88

铜虫 (初入文坛)

[求助] RNAiso plus / Trizol 提取细菌总RNA疑问 已有1人参与

大家好，
Sample Text买了takara的RNAiso plus，提取感染的植物组织没有问题，但是提取纯培养的细菌（液体培养基）的RNA时却很不顺利。之前没有任何经验，查了一些资料，还是有很多疑问，在此请教大家：

1.菌体（革兰氏阴性菌）需不需要提前破壁？我查到的文献和方法介绍，都是收集完菌体直接加RNAiso plus。但是查到用柱式试剂盒的方法里都有溶菌酶处理这一步。
2.菌体量和RNAiso plus用量的比例是多少比较合适？按细菌细胞数对应还是按菌体湿重对应？10的9次方菌还是100mg湿菌体对应1ml RNAiso plus?产量如何？

望有实际经验的虫友不吝赐教！谢谢
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1楼 2014-10-15 15:20:24
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wangranjun

荣誉版主 (知名作家)

广庭之惘然

优秀版主

【答案】应助回帖

没有必要去专门破壁的，对结果影响不大哎！我们一般都是根据经验加Trizol，不过按照菌体重量进行换算更好一些……
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他日扬翼九万里，历大千世界，定我红尘心！
2楼2014-10-21 17:46:46
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