24小时热门版块排行榜    

查看: 1116  |  回复: 4
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

ddcdqr

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么用Western blot检测全菌中的某个抗体? 已有3人参与

各位虫友,我最近通过原核表达获得了细菌的某个蛋白,并制备了多抗(免疫兔子),现在想用这个多抗去筛选有这个蛋白的细菌。但是这个细菌是革兰氏阳性菌,直接煮样的话,SDS-PAGE跑不下去,用溶菌酶处理,结果全都跑到最底部了,怎么处理比较好呢?纠结啊。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyuqing

捐助贵宾 (小有名气)

Enriching beads


【答案】应助回帖

LZ只是想要将能产目的蛋白的细菌筛选出来时吧,对于Western blot这个方法,我不是很了解。但是我倒是有别的方法能够将目的细菌抓出来。
Western blot只是能将细菌固定然后通过与一抗结合显现位置。
那为什么我们不用类似于免疫沉淀的方式将生物样品提取出来呢?
就是将一抗接于纳米磁球上,然后通过一抗与目的蛋白结合从而筛选出相应的细菌。
然后通过相应的仪器将磁球吸附出来,就可以得到目的细菌了吧。
3楼2014-10-24 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超声处理,或者反复冻融

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-10-15 10:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

直接煮沸什么都跑不出来的,溶菌酶处理效果没试过。机械破碎后再煮沸吧。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-11-21 17:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

对了,溶菌酶处理后,用多大浓度的分离胶?跑胶后条带分布如何?

发自小木虫Android客户端
5楼2015-11-21 17:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 318求调剂 +5 plum李子 2026-03-21 8/400 2026-03-25 09:26 by aa331100
[考研] 求调剂,一志愿:南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕,总分289分 +6 @taotao 2026-03-19 6/300 2026-03-25 08:37 by 木托莫露露
[考研] 考研调剂 +4 呼呼?~+123456 2026-03-24 4/200 2026-03-24 23:16 by barlinike
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 求调剂323材料与化工 +3 1124361 2026-03-24 3/150 2026-03-24 20:24 by peike
[考研] 085602 289分求调剂 +5 WWW西西弗斯 2026-03-24 5/250 2026-03-24 18:51 by jhhcooi
[考研] 资源与环境 调剂申请(333分) +7 holy J 2026-03-21 7/350 2026-03-24 17:24 by xiaohai104
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 081700 调剂 267分 +9 迷人的哈哈 2026-03-23 9/450 2026-03-24 11:58 by 544594351
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 336求调剂 +4 收到VS 2026-03-20 4/200 2026-03-23 19:02 by macy2011
[考研] 一志愿上海交大生物与医药专硕324分,求调剂 +5 jiajunX 2026-03-22 5/250 2026-03-23 18:07 by YMU施老师
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +8 tcxiaoxx 2026-03-20 9/450 2026-03-23 12:16 by tcxiaoxx
[考研] 寻找调剂 +4 倔强芒? 2026-03-21 4/200 2026-03-22 16:14 by 木托莫露露
[考研] 085600材料与化工306 +4 z1z2z3879 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:44 by ms629
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 0805材料320求调剂 +3 深海物语 2026-03-20 3/150 2026-03-21 15:46 by 无际的草原
[考研] 265求调剂 +12 梁梁校校 2026-03-19 14/700 2026-03-21 13:38 by lature00
[考研] 求调剂 +6 Mqqqqqq 2026-03-19 6/300 2026-03-21 08:04 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见