应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » EMSA/ChIP » 怎么用Western blot检测全菌中的某个抗体？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
51/1返回列表
查看: 1122  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ddcdqr

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么用Western blot检测全菌中的某个抗体？ 已有3人参与

各位虫友，我最近通过原核表达获得了细菌的某个蛋白，并制备了多抗（免疫兔子），现在想用这个多抗去筛选有这个蛋白的细菌。但是这个细菌是革兰氏阳性菌，直接煮样的话，SDS-PAGE跑不下去，用溶菌酶处理，结果全都跑到最底部了，怎么处理比较好呢？纠结啊。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-10-15 09:43:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
超声处理，或者反复冻融

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-10-15 10:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyuqing

捐助贵宾 (小有名气)

Enriching beads

【答案】应助回帖

LZ只是想要将能产目的蛋白的细菌筛选出来时吧，对于Western blot这个方法，我不是很了解。但是我倒是有别的方法能够将目的细菌抓出来。
Western blot只是能将细菌固定然后通过与一抗结合显现位置。
那为什么我们不用类似于免疫沉淀的方式将生物样品提取出来呢？
就是将一抗接于纳米磁球上，然后通过一抗与目的蛋白结合从而筛选出相应的细菌。
然后通过相应的仪器将磁球吸附出来，就可以得到目的细菌了吧。
赞一下 回复此楼
3楼2014-10-24 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

直接煮沸什么都跑不出来的，溶菌酶处理效果没试过。机械破碎后再煮沸吧。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2015-11-21 17:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)
对了，溶菌酶处理后，用多大浓度的分离胶？跑胶后条带分布如何？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2015-11-21 17:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ddcdqr 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 316求调剂 +4 江辞666 2026-03-26 4/200 2026-03-27 00:33 by wxiongid
[考研] 286求调剂 +5 PolarBear11 2026-03-26 5/250 2026-03-26 23:59 by 运气yunqi
[考研] 求调剂 一志愿 本科 北科大 化学 343 +6 13831862839 2026-03-24 7/350 2026-03-26 22:57 by 不吃魚的貓
[考研] 284求调剂 +9 junqihahaha 2026-03-26 10/500 2026-03-26 22:02 by 不吃魚的貓
[考研] 生物学学硕，一志愿湖南大学，初试成绩338 +4 YYYYYNNNNN 2026-03-26 4/200 2026-03-26 19:00 by macy2011
[考研] 281求调剂 +6 Koxui 2026-03-24 7/350 2026-03-26 15:37 by 无际的草原
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 寻找调剂 +5 倔强芒? 2026-03-21 8/400 2026-03-26 13:25 by 0906ljy
[考研] 环境专硕324分求调剂推荐 +5 轩小宁—— 2026-03-26 5/250 2026-03-26 12:05 by i_cooler
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 求调剂 +3 李李不服输 2026-03-25 3/150 2026-03-25 13:03 by cmz0325
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 070300化学求调剂 +9 苑豆豆 2026-03-20 9/450 2026-03-24 17:15 by licg0208
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 280分求调剂 一志愿085802 +4 PUMPT 2026-03-22 7/350 2026-03-22 22:13 by 星空星月
[考研] 材料与化工085600，总分304，本科有两篇sci参与，求调剂 +4 幸运的酱酱 2026-03-22 5/250 2026-03-22 20:15 by edmund7
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭