24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1172  |  回复: 4

ddcdqr

新虫 (初入文坛)

[求助] 怎么用Western blot检测全菌中的某个抗体? 已有3人参与

各位虫友,我最近通过原核表达获得了细菌的某个蛋白,并制备了多抗(免疫兔子),现在想用这个多抗去筛选有这个蛋白的细菌。但是这个细菌是革兰氏阳性菌,直接煮样的话,SDS-PAGE跑不下去,用溶菌酶处理,结果全都跑到最底部了,怎么处理比较好呢?纠结啊。。。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
超声处理,或者反复冻融

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-10-15 10:52:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hyuqing

捐助贵宾 (小有名气)

Enriching beads


【答案】应助回帖

LZ只是想要将能产目的蛋白的细菌筛选出来时吧,对于Western blot这个方法,我不是很了解。但是我倒是有别的方法能够将目的细菌抓出来。
Western blot只是能将细菌固定然后通过与一抗结合显现位置。
那为什么我们不用类似于免疫沉淀的方式将生物样品提取出来呢?
就是将一抗接于纳米磁球上,然后通过一抗与目的蛋白结合从而筛选出相应的细菌。
然后通过相应的仪器将磁球吸附出来,就可以得到目的细菌了吧。
3楼2014-10-24 11:23:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

直接煮沸什么都跑不出来的,溶菌酶处理效果没试过。机械破碎后再煮沸吧。

发自小木虫Android客户端
4楼2015-11-21 17:45:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wxy_0808

铁杆木虫 (正式写手)

对了,溶菌酶处理后,用多大浓度的分离胶?跑胶后条带分布如何?

发自小木虫Android客户端
5楼2015-11-21 17:47:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ddcdqr 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 揭秘青基评审内幕:几个A才能顺利中标 +3 国自然国社科中 2026-05-23 4/200 2026-05-23 15:37 by 2000zf36392
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +4 木虫研究牲 2026-05-17 5/250 2026-05-23 14:44 by 期刊投稿求助
[考博] 26/27申博自荐 10+4 ZXW0202 2026-05-22 6/300 2026-05-23 14:32 by tfang
[基金申请] 河北省自然科学基金 +5 Peterchao 2026-05-18 6/300 2026-05-23 13:28 by Peterchao
[基金申请] 青B发送上会通知了吗 +5 chemBioBro 2026-05-22 7/350 2026-05-23 12:35 by zhuifengzhy
[考博] 博士申请 +3 焦晓明 2026-05-21 3/150 2026-05-23 11:26 by mlc840311
[教师之家] 某211大学教师把个人教师官方主页改成:我跑了我跑了我跑了!官宣跑路! +3 zju2000 2026-05-21 4/200 2026-05-23 08:33 by xli1984
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +27 国自然国社科中 2026-05-17 28/1400 2026-05-22 16:25 by hunter无悔
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +4 希冀,有书读 2026-05-20 8/400 2026-05-22 10:16 by 希冀,有书读
[文学芳草园] 献血感触 +7 呀呀好傻 2026-05-19 13/650 2026-05-21 20:15 by 呀呀好傻
[基金申请] 面上本子正文33页,违规吗?会被低分嘛? +14 1234567wang 2026-05-17 16/800 2026-05-21 17:58 by 脆脆的饼干
[基金申请] 国自然评分 +4 无名者登山 2026-05-20 5/250 2026-05-21 16:35 by swuq
[基金申请] 国自然上会要求 +7 无名者登山 2026-05-18 11/550 2026-05-21 15:50 by draco1987
[基金申请] 提交了我也来说说感想 +9 fummck 2026-05-20 10/500 2026-05-21 14:17 by draco1987
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[考博] 如果工作了想读博,可以边工作边读全日制嘛? 30+3 铁达火车 2026-05-18 5/250 2026-05-20 09:33 by tfang
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
信息提示
请填处理意见