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新虫 (初入文坛)

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[求助] 怎么用Western blot检测全菌中的某个抗体？已有3人参与

各位虫友，我最近通过原核表达获得了细菌的某个蛋白，并制备了多抗（免疫兔子），现在想用这个多抗去筛选有这个蛋白的细菌。但是这个细菌是革兰氏阳性菌，直接煮样的话，SDS-PAGE跑不下去，用溶菌酶处理，结果全都跑到最底部了，怎么处理比较好呢？纠结啊。。。

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1楼 2014-10-15 09:43:56

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bio_sci

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【答案】应助回帖

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超声处理，或者反复冻融

[ 发自小木虫客户端 ]

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2楼2014-10-15 10:52:49

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hyuqing

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【答案】应助回帖

LZ只是想要将能产目的蛋白的细菌筛选出来时吧，对于Western blot这个方法，我不是很了解。但是我倒是有别的方法能够将目的细菌抓出来。
Western blot只是能将细菌固定然后通过与一抗结合显现位置。
那为什么我们不用类似于免疫沉淀的方式将生物样品提取出来呢？
就是将一抗接于纳米磁球上，然后通过一抗与目的蛋白结合从而筛选出相应的细菌。
然后通过相应的仪器将磁球吸附出来，就可以得到目的细菌了吧。

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3楼2014-10-24 11:23:06

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