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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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a1249886766

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样实现DNA杂交?只将两条DNA链简单混合室温反应可以吗? 已有1人参与

我的两条链的Tm值均为48摄氏度,因为链的端部连有生物素和亲和素,想问这两条链室温下可以杂交吗?看文献上说要先95摄氏度加热5min,再降温,方可实现杂交吗?杂交大概需要多长时间呢?不胜感激!
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科研
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
a1249886766(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:06:52
a1249886766: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢啦! 2014-10-16 08:08:10
生物素不影响杂交,但是亲和素可能与生物素结合影响杂交,高温变性后降温就行。
2楼2014-10-15 09:26:44
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a1249886766

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 09:26:44
生物素不影响杂交,但是亲和素可能与生物素结合影响杂交,高温变性后降温就行。

亲和素可能与生物素结合影响杂交是什么意思?
科研
3楼2014-10-16 08:06:25
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a1249886766

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 09:26:44
生物素不影响杂交,但是亲和素可能与生物素结合影响杂交,高温变性后降温就行。

是因为亲和素体积大的缘故吗?我的两条DNA单链只有15个碱基,杂交的话是不是机会很小了?
科研
4楼2014-10-16 08:28:37
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honghong1203

铜虫 (小有名气)

楼主问题解决了没,同问啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
5楼2014-10-25 10:45:06
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a1249886766

银虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by honghong1203 at 2014-10-25 10:45:06
楼主问题解决了没,同问啊

Tm-15摄氏度杂交3小时,能连上但不太稳定。
科研
6楼2014-10-26 08:58:08
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