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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » 怎样实现DNA杂交？只将两条DNA链简单混合室温反应可以吗？
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a1249886766

银虫 (小有名气)

[求助] 怎样实现DNA杂交？只将两条DNA链简单混合室温反应可以吗？ 已有1人参与

我的两条链的Tm值均为48摄氏度，因为链的端部连有生物素和亲和素，想问这两条链室温下可以杂交吗？看文献上说要先95摄氏度加热5min，再降温，方可实现杂交吗？杂交大概需要多长时间呢？不胜感激！
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科研
1楼 2014-10-12 20:32:08
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
a1249886766(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-10-15 15:06:52
a1249886766: 金币+4, ★★★很有帮助, 谢谢啦！ 2014-10-16 08:08:10
生物素不影响杂交，但是亲和素可能与生物素结合影响杂交，高温变性后降温就行。
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2楼2014-10-15 09:26:44
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a1249886766

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 09:26:44
生物素不影响杂交，但是亲和素可能与生物素结合影响杂交，高温变性后降温就行。

亲和素可能与生物素结合影响杂交是什么意思？
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科研
3楼2014-10-16 08:06:25
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a1249886766

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2014-10-15 09:26:44
生物素不影响杂交，但是亲和素可能与生物素结合影响杂交，高温变性后降温就行。

是因为亲和素体积大的缘故吗？我的两条DNA单链只有15个碱基，杂交的话是不是机会很小了？
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科研
4楼2014-10-16 08:28:37
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honghong1203

铜虫 (小有名气)
楼主问题解决了没，同问啊

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-10-25 10:45:06
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a1249886766

银虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by honghong1203 at 2014-10-25 10:45:06
楼主问题解决了没，同问啊

Tm-15摄氏度杂交3小时,能连上但不太稳定。
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科研
6楼2014-10-26 08:58:08
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