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1056336909银虫 (小有名气)
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关于DNA碱基配对反应的条件 已有2人参与
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| 有没有哪位大神知道单链DNA通过碱基配对反应形成双链的实验条件,比如温度、时间、缓冲液等,最好提供一些资料,感激不尽。PS:最好再提供一下双链DNA解链时的实验条件,thanks again. |
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2楼2013-12-13 11:08:37
1056336909
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gyesang: 金币+5, 鼓励交流! 2013-12-13 14:55:44
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单链DNA是否自身配对,取决于其碱基序列和长度。如果单链DNA序列里有互补的区间,并且长度也可以容忍其自身配对所产生的张力,就会发生自配对。比如举个粗糙的例子,AAGGCCTTNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNAAGGCCTT,两端可能就会发生配对。 之所以要先加热到95度,就是希望单链DNA自身的氢键,离子键等等全部被打破,继而在缓慢降温的情况下,与另一单链DNA形成双链DNA,降温过程一定要缓慢,严禁冷激,否则会发生非特异性的配对。所以通常用单链DNA制备双链DNA时,保险起见,加热到95度这个过程是不省略的,至少我看到的文献都是如此,而且这个过程也并不繁琐,有个加热块就行了,没必要省略。 |
6楼2013-12-13 13:09:10











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