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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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阳光xiaona

金虫 (小有名气)

[求助] 关于细胞染色 已有2人参与

请问各位高手,有谁做过用PI染MCF-7细胞,我想问一下以下几个问题:非常感谢!
1.PI是染死细胞的吗?浓度多少?
2.接种的时候每孔细胞浓度约为多少?培养基浓度?
3.加PI的时候需要避光吗?
4.PI加入孔之后在培养箱放置48h还有效吗?如果每隔12h荧光观察可以吗?荧光观察之后还想明场观察可以吗?
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铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PI是碘化丙啶,EB是溴化乙锭。我只用EB染过,直接染的活细胞观察凋亡,我试过固定细胞后再染,结果细胞全被染色,不行。还有染完后尽量在短时间内观察,因为是活细胞染色。
PI需要避光保存。
细胞接种浓度可以是2*10的4次方。
PI放培养箱48h问题不大,可以随便找细胞染色试试。
荧光观察之后可以用明场观察,很多都是先明场观察,后用荧光观察。
3楼2014-10-17 09:57:11
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

买试剂盒就知道了,我也没做过
活细胞固定后能用PI染色,而且凋亡细胞的DNA染色弱;如果不固定,PI只能进入坏死细胞。
2楼2014-10-17 09:27:51
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