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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 材料区 » 生物材料 » 生物效应评价 » 新手问下：细胞在材料表面的黏附观察，染色前要固定么？
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fightfor2012

金虫 (小有名气)

[交流] 新手问下：细胞在材料表面的黏附观察，染色前要固定么？ 已有5人参与

各位哥哥姐姐们：
    我打算在碳纤维纸上看细胞的黏附，想用荧光显微镜看，以前没有做过，打算用AO/EB染色，请问壁细胞染色前需要固定么？请给点详细的步骤或指点？不胜感激！
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1楼 2012-12-05 12:48:44
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letianyao

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
mwyuer: 金币+1, 感谢回帖交流 2012-12-05 17:11:58
不需要固定。具体步骤可以看看文献，例如Ionic liquid- associated synthesis of water-soluble and biocompatible cellulose/SWCNTs complex，Journal of Material Chemisty, 2009, 19, 3612-7。  Core@Shell Nanostructures for Photothermal Conversion: Tunable Noble Metal Nanoshells on Cross-linked Polymer Submicro-spheres. Journal of Material Chemisty, 2010, 20(26): 5493-8。等
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生物纳米材料，高分子化学与物理
2楼2012-12-05 13:35:16
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fightfor2012

金虫 (小有名气)
thank you so much!
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3楼2012-12-05 21:00:33
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fightfor2012

金虫 (小有名气)
AO/EB double staining
DNA-binding dyes AO and EB were used for the morphological
detection of apoptotic and necrotic cells.40 After being cultured
on SWCNT scaffolds or glass slides for 72 h, the cells were
washed with sterilized PBS and stained with a mixture of AO
(5 mg mL1) and EB (5 mg mL1) at room temperature for 5 min.
以前没有做过，还想问的是染色的话，一般加染色液多少量？还有稀释的时候用pbs么？
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4楼2012-12-06 10:49:47
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yifeng1206

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
要染色的话 还是固定比较好点吧
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5楼2012-12-08 10:21:31
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夏南

金虫 (正式写手)

深度强迫症患者
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎新虫来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-12 12:12:25
我们做的活死染色是用戊二醛固定后才进行染色的。建议染色前固定。
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假装文艺青年的科技工作者。
6楼2012-12-12 11:50:04
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tanyanfei

金虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
红舟流星: 金币+1, 应助指数+1, 欢迎来到生物功能材料板块应助交流 2012-12-12 12:12:16
做AO/EB染色的话，不需要固定。AO对活细胞和死细胞都能够染色，活细胞表现为细胞核亮绿色，细胞质橙黄色，挺漂亮的；死细胞被染色成红色。
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7楼2012-12-12 12:01:39
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god1985

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
黄酮: 金币+1, 谢谢回帖交流 2012-12-13 18:43:49
一般都需要固定，特别是你要看黏附形态，不固定的话，一些微观结构，如丝状伪足等会看不见，也可以做个鬼笔环肽染色，看得那叫一个清楚
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8楼2012-12-13 15:40:54
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