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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 关于细胞染色
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阳光xiaona

金虫 (小有名气)

[求助] 关于细胞染色 已有2人参与

请问各位高手，有谁做过用PI染MCF-7细胞，我想问一下以下几个问题：非常感谢！
1.PI是染死细胞的吗？浓度多少？
2.接种的时候每孔细胞浓度约为多少？培养基浓度？
3.加PI的时候需要避光吗？
4.PI加入孔之后在培养箱放置48h还有效吗？如果每隔12h荧光观察可以吗？荧光观察之后还想明场观察可以吗？
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1楼 2014-10-10 09:35:18
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

买试剂盒就知道了，我也没做过
活细胞固定后能用PI染色，而且凋亡细胞的DNA染色弱；如果不固定，PI只能进入坏死细胞。
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2楼2014-10-17 09:27:51
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j1234555jhh

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

PI是碘化丙啶，EB是溴化乙锭。我只用EB染过，直接染的活细胞观察凋亡，我试过固定细胞后再染，结果细胞全被染色，不行。还有染完后尽量在短时间内观察，因为是活细胞染色。
PI需要避光保存。
细胞接种浓度可以是2*10的4次方。
PI放培养箱48h问题不大，可以随便找细胞染色试试。
荧光观察之后可以用明场观察，很多都是先明场观察，后用荧光观察。
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3楼2014-10-17 09:57:11
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