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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 综合其他 » 染色后血球计数板的格子看不清
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在水一方1116

新虫 (初入文坛)

[求助] 染色后血球计数板的格子看不清已有3人参与

我想用显微镜观察重金属处理后的根尖细胞的死细胞和活细胞的数量，染色后死细胞是蓝色，活细胞是无色的。我想用血球计数法观察，但是染色后血球计数板的格子就看不清了，没法数。如果染色液浓度降低，细胞染色就不明显，但是能看清格子。但是染色明显后又看不清格子了。求帮助啊
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1楼2013-12-22 21:15:09
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wwp3175

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
死细胞和活细胞的区别染色，何不用TTC法。TTC法原理 TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替(TTF)。呵呵，你查查这个方法，应用好多哦
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2楼2013-12-23 14:32:07
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在水一方1116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wwp3175 at 2013-12-23 14:32:07
死细胞和活细胞的区别染色，何不用TTC法。TTC法原理 TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)的氧化态是无色的,可被氢还原成不溶性的红色三苯甲月替(TTF)。呵呵，你查查这个方法，应用好多哦

恩恩 我试试 谢谢啦
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3楼2013-12-25 12:32:06
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破电脑

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

处理时间短的话，可以在处理前做活菌计数，处理后再做活菌计数，差值就是死菌数。
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4楼2013-12-26 08:11:59
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在水一方1116

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 破电脑 at 2013-12-26 08:11:59
处理时间短的话，可以在处理前做活菌计数，处理后再做活菌计数，差值就是死菌数。

现在就是计数有点小问题。。。。
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5楼2013-12-26 10:57:56
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破电脑

金虫 (小有名气)
菌落计数多容易啊，系列稀释，然后1毫升菌液加适当的培养基，培养计数。
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6楼2013-12-27 07:43:02
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青铜时代

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用的台盼蓝染色吧。这是经典的染色法，不至于出现什么问题的。
楼主这种情况可考虑：
1）染液保存过久，这种情况建议更换新批号或重新配制。
2）细胞比较特殊，这种情况建议换种其他染色法。这种情况，如果有其他细胞系，事先可用同批染液做一对照。
3）还有一种情况，培养的细胞状态好，死细胞本来就极少，而你非要找出“死”细胞，故而使用了不合理的染液浓度，从而使背景颜色过深，影响计数。这种情况，最好把细胞养老点，看看死细胞在标准操作下的染色情况。
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7楼2013-12-27 09:28:52
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