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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 想用血球计数板来确定细菌数量 那种显微镜合适
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chengch0447

木虫 (正式写手)

[求助] 想用血球计数板来确定细菌数量 那种显微镜合适

本人非生物专业，由于近期要做一点生物试验，物理灭菌类的，涉及到确定细菌数量，看到一些文章中提到可以采用血球计数板法来实现，所以想来问问需要配那些附件，重点是什么样的显微镜合适，最好有牌子和型号，这样对于我这样的门外汉就是莫大的帮助了，非常感谢。
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小白中的小白
1楼 2012-12-04 17:19:17
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回帖置顶 ( 共有1个 )

mizhoulong

木虫 (著名写手)

环境卫生、微生物学

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+2, MicEPI+1, 鼓励交流 2012-12-06 16:37:23
这个很简单的，只需要能用油镜的光学显微镜就行了。
但是细菌不染色的话，在油镜下可能会显示的不好。
细菌活细胞染色法我是用过的，但是我用的是荧光显微镜。

还有一种方法，就是不需要细胞计数器，是通过一种算法，显微镜下每个视野的面积是可以算出来的，滤膜的面积也是可以算出来的，假设细菌在滤膜上是均匀分布的，那么用油镜视野下下细菌的数目可以推算出细菌的数目，这个误差可能会比较大，一般需要求10个以上视野的平均值。
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环境卫生、微生物学、卫生应急
7楼2012-12-06 01:59:52
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普通回帖

缺友情

荣誉版主 (文学泰斗)

此漂已死，有事烧纸 4-8

优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2012-12-05 15:10:49
不知道你需要计算的那类细菌啊？比较大的细菌使用常规的光学显微镜就可以实现了，不需要特定的牌子或者规格什么的来着。至于血球计数法，你可以查一下方法，网上应该有很多的。
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有些累了，淡了，该去了～
2楼2012-12-04 18:30:02
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chengch0447

木虫 (正式写手)
想用显微镜 来计数 金葡 大肠 和绿脓
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小白中的小白
3楼2012-12-05 10:07:33
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d3dong

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
chengch0447: 金币+1, ★有帮助 2012-12-05 14:23:11
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流！ 2012-12-05 15:11:07
我确实没听过可以拿细胞计数板确定细菌数量的，你做的是什么样品，要是可以融到水里，就可以拿琼脂平板计数，要是是表面涂抹的话，就得涂抹之后再弄到液体里，再拿琼脂平板计数。金葡可以用这个方法，大肠的话用MPN法，有相应的3M纸片，直接用就是，绿脓没做过，不知道！希望对你有帮助
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4楼2012-12-05 12:44:10
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d3dong

金虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by d3dong at 2012-12-05 12:44:10
我确实没听过可以拿细胞计数板确定细菌数量的，你做的是什么样品，要是可以融到水里，就可以拿琼脂平板计数，要是是表面涂抹的话，就得涂抹之后再弄到液体里，再拿琼脂平板计数。金葡可以用这个方法，大肠的话用MPN ...

对了，至于显微镜，普通光学显微镜理论上是可以看到细胞计数板上的细菌，即使油镜也没问题，这个国产的和进口的都差不多，都是可以看得。
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5楼2012-12-05 12:45:46
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chengch0447

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by d3dong at 2012-12-05 12:44:10
我确实没听过可以拿细胞计数板确定细菌数量的，你做的是什么样品，要是可以融到水里，就可以拿琼脂平板计数，要是是表面涂抹的话，就得涂抹之后再弄到液体里，再拿琼脂平板计数。金葡可以用这个方法，大肠的话用MPN ...

您说的表面涂抹的方法我们现在遇到的问题就是，涂抹到表面后等风干后处理，发现不处理的也都死光了，所以很头痛，现在就是想找可以改进或替代的方法，谢谢
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小白中的小白
6楼2012-12-05 14:22:44
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lark001

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
rainwander: 金币+3, 鼓励交流 2012-12-06 16:37:31
chengch0447: 金币+4, ★★★很有帮助, 非常感谢 2012-12-10 15:31:56
一般用Olympus的荧光显微镜，放大到40*10倍（物镜*目镜）即可，将菌液（适当稀释）染色，滴至血球计数板，低倍下找准位置，再放大倍数，数落到中方格子里面的细胞数目（染色后在荧光下发荧光很容易辨认），一般10个一下比较合适，细菌数过多要再稀释，。注意的是计数区的刻度有两种（16个中方格和25个中方格），具体操作看说明即可。
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8楼2012-12-06 14:51:51
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