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ggyy0911铁虫 (正式写手)
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求赐教，扩增3000bp片段是用高保真Taq酶好，还是用高保真再加A尾好一点？ 已有6人参与
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实验室有全式金的FastPfu，扩增效率挺高的，倒是不存在一般的高保真酶扩增效率低的问题。不过这个真心贵，有点杀鸡焉用宰牛刀的感觉。我片段3000bp出头，想连T载体，用高保真的话要做完纯化加A尾，但是不知道加A尾后连接效率怎么样。 用高保真的Taq酶也行，但是看说明书也有说为了提高连接效率，可以纯化再加A尾，再连，这样和高保真一样繁琐了，还不如直接用高保真。如果这样再加一次A尾，连接效率会提高，倒也值得一试。 此外，加A尾对Taq酶有要求吗？用高保真的Taq酶和普通Taq酶是不是一样的呢？ 希望高手能指点一二，万分感谢。 |
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这会没确定酶实验都做不下去了。 10楼2014-09-30 09:36:20
