应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 层析/纯化 » 葡聚糖凝胶装柱时，流速很慢，何种原因？如何解决？
151/2返回列表12下一页
查看: 6199  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

celine_21

新虫 (初入文坛)

[求助] 葡聚糖凝胶装柱时，流速很慢，何种原因？如何解决？ 已有7人参与

大家好，这次是在装柱的过程中碰上了一个问题，装柱时流速就已经非常的慢，根本无法进行上样层析，希望有蛋白层析纯化的高手帮忙解决。
我选用GE的葡聚糖G-200凝胶进行装柱：柱子是内径1cm,高度55cm左右的柱子。按照一般的装柱方法，填料超声1min后搅拌后装柱。比对过装柱，操作过程并没有问题，但是填料沉积的过程从一开始就非常慢，沉降1个小时，才堆积不到2cm的高度。并且装柱完成后，测定了下流速，16分钟内，才0.7mL。这一流速是在太慢，根本无法进行层析。
这是何原因，如何才能解决？还希望各位高手能够提供。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-09-29 10:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

单体化合物

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶住，本来就是很慢的，你的正常

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2014-10-01 10:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zwt369

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
最近也在装凝胶层析柱，我用的是G-25的，感觉沉降很快的啊，你说一小时才2cm真是很慢，会不会是你的干胶没有溶胀完全呢，或者把柱子下端拧开，一边流一边沉降呢？我也是新手，咱们可以互相交流！
赞一下 回复此楼
学无止尽，永远努力！
2楼2014-09-29 10:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celine_21

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zwt369 at 2014-09-29 10:22:40
最近也在装凝胶层析柱，我用的是G-25的，感觉沉降很快的啊，你说一小时才2cm真是很慢，会不会是你的干胶没有溶胀完全呢，或者把柱子下端拧开，一边流一边沉降呢？我也是新手，咱们可以互相交流！

填料是已经溶胀好，之前的人已经用过的，但他们的流速是具体是多少，报告中没有，无法参考。至于沉降也是一边流一边沉降的，结果就是一个小时才2cm.
赞一下 回复此楼
3楼2014-09-29 10:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwt369

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用过的就要再生啊，或者胶上面粘附了一些杂质导致沉降慢呢？
赞一下 回复此楼
学无止尽，永远努力！
4楼2014-09-29 10:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celine_21

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by zwt369 at 2014-09-29 10:35:15
用过的就要再生啊，或者胶上面粘附了一些杂质导致沉降慢呢？

填料已经用20%乙醇4度保存的，我是准备像离子交换柱一样，先装好柱子后，再用碱洗，之后再平衡的。这样应该就没问题才是的。
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-29 10:42:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我用过G-25和G-200，G-200流速就是很慢，如果是新的还好，用过的流速真心慢的让人抓狂，可能是没有再生好，上面粘的杂志没除干净。不过沉降速度好像没发现有什么问题。
赞一下 回复此楼
6楼2014-10-01 08:42:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
可以做个装柱器也可以把两个柱子加起来成简易装柱器。一次性加完过夜沉降。不够g系列的凝胶除了脱盐g25基本都淘汰了。推荐使用superdex系列

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
7楼2014-10-01 10:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appleren

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
凝胶分离的效率不高，所以柱子要装长，走的慢才效果好，一般都是一滴一滴走，

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
9楼2014-10-01 10:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appleren

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by appleren at 2014-10-01 10:44:46
凝胶分离的效率不高，所以柱子要装长，走的慢才效果好，一般都是一滴一滴走，

柱子下端沙板堵了，或者棉花赛多了？

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-01 10:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 celine_21 的主题更新
151/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 6/300 2026-10-31 23:23 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 7/350 2026-10-31 23:18 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-10-31 23:17 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 5/250 2026-10-31 23:10 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 23:10 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 12/600 2026-10-31 22:52 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 14/700 2026-10-31 22:46 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 24/1200 2026-10-31 22:39 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 11/550 2026-10-31 22:39 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 21:51 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-10-31 21:51 by YXM1FDCSE8Bn
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 10/500 2026-10-31 21:41 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 11/550 2026-10-31 21:25 by YXM1FDCSE8Bn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-10-31 17:12 by hKe7U1kad5Sg
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 18/900 2026-10-31 17:05 by hKe7U1kad5Sg
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
[基金申请] 论文的挂名怎么评判贡献？基金申请中，排名第一的挂名文章 +3 biily 2026-10-25 3/150 2026-10-30 18:33 by 旁观2020
[硕博家园] 申博自荐 2篇一区TOP+1篇EI+2公开发明专利 2027博士申请 +3 小小阿光 2026-10-27 3/150 2026-10-29 23:56 by 起风了的快乐
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭