24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 5401  |  回复: 14

celine_21

新虫 (初入文坛)

[求助] 葡聚糖凝胶装柱时,流速很慢,何种原因?如何解决? 已有7人参与

大家好,这次是在装柱的过程中碰上了一个问题,装柱时流速就已经非常的慢,根本无法进行上样层析,希望有蛋白层析纯化的高手帮忙解决。
我选用GE的葡聚糖G-200凝胶进行装柱:柱子是内径1cm,高度55cm左右的柱子。按照一般的装柱方法,填料超声1min后搅拌后装柱。比对过装柱,操作过程并没有问题,但是填料沉积的过程从一开始就非常慢,沉降1个小时,才堆积不到2cm的高度。并且装柱完成后,测定了下流速,16分钟内,才0.7mL。这一流速是在太慢,根本无法进行层析。
这是何原因,如何才能解决?还希望各位高手能够提供。
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

单体化合物

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
凝胶住,本来就是很慢的,你的正常

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-10-01 10:27:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

zwt369

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
最近也在装凝胶层析柱,我用的是G-25的,感觉沉降很快的啊,你说一小时才2cm真是很慢,会不会是你的干胶没有溶胀完全呢,或者把柱子下端拧开,一边流一边沉降呢?我也是新手,咱们可以互相交流!
学无止尽,永远努力!
2楼2014-09-29 10:22:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celine_21

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zwt369 at 2014-09-29 10:22:40
最近也在装凝胶层析柱,我用的是G-25的,感觉沉降很快的啊,你说一小时才2cm真是很慢,会不会是你的干胶没有溶胀完全呢,或者把柱子下端拧开,一边流一边沉降呢?我也是新手,咱们可以互相交流!

填料是已经溶胀好,之前的人已经用过的,但他们的流速是具体是多少,报告中没有,无法参考。至于沉降也是一边流一边沉降的,结果就是一个小时才2cm.
3楼2014-09-29 10:31:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zwt369

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用过的就要再生啊,或者胶上面粘附了一些杂质导致沉降慢呢?
学无止尽,永远努力!
4楼2014-09-29 10:35:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

celine_21

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by zwt369 at 2014-09-29 10:35:15
用过的就要再生啊,或者胶上面粘附了一些杂质导致沉降慢呢?

填料已经用20%乙醇4度保存的,我是准备像离子交换柱一样,先装好柱子后,再用碱洗,之后再平衡的。这样应该就没问题才是的。
5楼2014-09-29 10:42:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我用过G-25和G-200,G-200流速就是很慢,如果是新的还好,用过的流速真心慢的让人抓狂,可能是没有再生好,上面粘的杂志没除干净。不过沉降速度好像没发现有什么问题。
6楼2014-10-01 08:42:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

myheat

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以做个装柱器也可以把两个柱子加起来成简易装柱器。一次性加完过夜沉降。不够g系列的凝胶除了脱盐g25基本都淘汰了。推荐使用superdex系列

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-10-01 10:25:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appleren

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
凝胶分离的效率不高,所以柱子要装长,走的慢才效果好,一般都是一滴一滴走,

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-10-01 10:44:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appleren

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by appleren at 2014-10-01 10:44:46
凝胶分离的效率不高,所以柱子要装长,走的慢才效果好,一般都是一滴一滴走,

柱子下端沙板堵了,或者棉花赛多了?

[ 发自小木虫客户端 ]
10楼2014-10-01 10:47:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 celine_21 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 22408 359分调剂 +3 Qshers 2026-03-27 4/200 2026-03-28 16:45 by Qshers
[考研] 085600,材料与化工321分求调剂 +9 大馋小子 2026-03-28 9/450 2026-03-28 14:56 by 神马都不懂
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-27 6/300 2026-03-28 14:10 by 唐沐儿
[考研] 0856求调剂 +11 zhn03 2026-03-25 12/600 2026-03-28 13:32 by 唐沐儿
[考研] 085701环境工程,267求调剂 +16 minht 2026-03-26 16/800 2026-03-28 12:16 by zllcz
[考研] 材料与化工考研调剂 +17 孅華 2026-03-22 17/850 2026-03-28 08:35 by WYUMater
[考研] 086000调剂 +3 7901117076 2026-03-26 3/150 2026-03-27 21:34 by Jianing_Mi
[考研] 考研调剂 +4 Sanmu-124 2026-03-26 4/200 2026-03-27 17:49 by kiokin
[考研] 一志愿南师大0703化学 275求调剂 +4 Ripcord上岸 2026-03-27 4/200 2026-03-27 17:00 by zhyzzh
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +4 倾____萧 2026-03-27 5/250 2026-03-27 11:52 by zhshch
[考研] 调剂推荐 +5 清酒714 2026-03-26 6/300 2026-03-27 11:12 by 不吃魚的貓
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 343求调剂 +4 赠我一本书 2026-03-23 4/200 2026-03-27 00:40 by wxiongid
[考研] 081200-11408-276学硕求调剂 +3 崔wj 2026-03-26 3/150 2026-03-26 19:57 by nihaoar
[考研] 281求调剂 +3 亚克西good 2026-03-26 5/250 2026-03-26 19:48 by 不吃魚的貓
[考研] 一志愿天津大学339材料与化工求调剂 +3 江往卖鱼 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:42 by 王小欠i
[考研] 求b区院校调剂 +4 周56 2026-03-24 5/250 2026-03-25 17:12 by yishunmin
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
信息提示
请填处理意见