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铁虫 (初入文坛)

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[求助] 磁珠法提取细菌DNA纯度较低，求助已有1人参与

如下表所示，我用核酸提取仪，提取大肠杆菌的核酸，A1-D1加入裂解液和离心后的细菌，A2-D2加入磁珠和结合液，3排到5排加入70%乙醇，A6-D6加入洗脱液。
但是核酸的浓度虽然不低，但是核酸的纯度，太低了，我想请问一下，什么方法可以提高细菌DNA的出纯度？
1    2 3 4 5 6
A
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D

Sample ID Date       ng/ul A260 A280 260/280 260/230
A6 2014/9/18 296.49 5.93          4.575    1.3          0.87
B6 2014/9/18 323.82 6.476 4.999 1.3          0.96
C6 2014/9/18 256.57 5.131 4.023 1.28 0.81
D6 2014/9/18 233.85 4.677 3.684 1.27          0.76

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南京晓劢生物科技有限公司磁珠法核酸提取试剂盒系列纳米材料磁珠石墨烯纳米金核酸提取仪器

1楼 2014-09-21 19:08:08

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Harrylujah

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

没用过提取仪，不过A280高的话，蛋白污染应该比较大，增长proteinase k的孵育时间。A230那边你有没有直接拿磁珠溶液进行OD看各项数据，我自己做的NTC磁珠提取液A230、A260很高的，也就是说磁珠本身对吸光度有影响的。你最好确认一下提取液有没有磁珠残留，以及磁珠自身对OD的影响。个人认为试剂残留的影响不多的，怕WB残留可以多airdry一段时间