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磁珠试剂盒提取细胞中DNA 已有2人参与
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求推荐适合的相应的磁珠提取DNA试剂盒，要求如下： 1.提取动物细胞培养液中的基因组DNA； 2.磁珠粒径最好为nm级； 3.手提； 4.请指出试剂盒中哪一步去除蛋白质、哪一步去除RNA、磁珠洗脱的条件控制~~ 这几个月一直在摸索中、还是一头雾水。  谢谢，请大仙指教~~~  |
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 磁珠 |
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zhangyunjing
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【答案】应助回帖
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感谢参与，应助指数 +1
freerf(西门吹雪170代发): 金币+5, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:39:48
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freerf(西门吹雪170代发): 金币+5, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:39:48
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你是要研发磁珠法DNA抽提试剂盒吗？ 1.关于抽提的细胞中的基因组DNA，首先你要找到合适的裂解液。 2. 磁珠粒径不是关键，关键的是你选的磁珠磁吸附力好，而且结合DNA分子的特异性强，结合时间短，一般用于核酸提取的磁珠的粒径在1 uM左右。 3. 手提的话需要磁力架，生工有卖的，很便宜 4. 去除蛋白、RNA等要在磁珠结合DNA步骤之前，否则磁珠也会结合RNA分子 5. 关于磁珠洗脱条件的控制，因磁珠而异，不同的磁珠洗脱条件差别还是很大的 |
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freerf
4楼2014-09-12 10:14:59
zhangyunjing
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freerf: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢~~我周一咨询下商家 2014-09-13 20:42:22
freerf: 金币+30, ★★★很有帮助, 谢谢~~我周一咨询下商家 2014-09-13 20:42:22
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1. 我用的是上海生工的磁珠法动物组织DNA抽提试剂盒，产品编号是SK8721。 2. 关于你提到的无需洗脱直接以磁珠为模板，进行下一步实验，我们用过生工的磁珠法质粒抽提试剂盒，磁珠经过洗涤和干燥之后，直接加入PCR反应体系所需要的组分，然后以磁珠为模板，进行PCR，确实能够扩增出目的条带，而且条带挺亮的。 3. 不知道你用下游做什么实验。 4.关于洗脱条件的问题，不同的磁珠洗脱条件有差别的，这与磁珠的性质有关，有的磁珠需要高温水浴洗脱，洗脱过程中间或混匀；有的磁珠常温洗脱效率也很好，就看你用的是哪家公司的磁珠了。 5. 关于你提到的DNA得率低的问题，如果是你自己买的磁珠做的话，需要自己摸索最佳的结合条件，包括结合液的组分和结合时间，如果结合效率很低的话，你的得率自然也很低，建议你买成熟的磁珠法试剂盒，自己摸索需要很久的时间的。 6. 关于磁珠法DNA提取建议你打电话到生工咨询一下，他们对这方面的研究还是挺深入的。 |
10楼2014-09-12 16:20:41
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