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freerf

新虫 (小有名气)

[求助] 磁珠试剂盒提取细胞中DNA 已有2人参与

求推荐适合的相应的磁珠提取DNA试剂盒,要求如下:
1.提取动物细胞培养液中的基因组DNA;
2.磁珠粒径最好为nm级;
3.手提;
4.请指出试剂盒中哪一步去除蛋白质、哪一步去除RNA、磁珠洗脱的条件控制~~
这几个月一直在摸索中、还是一头雾水。谢谢,请大仙指教~~~
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freerf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by freerf at 2014-09-12 10:32:48
谢谢,您的解答对我很有启发。
关于2. 我是需要用这种试剂盒、用于后续的实验,后续实验要求磁珠的粒径尽量小。后续实验其实不需要洗脱这一步、带着磁珠直接做,但因我要考查整个实验的提取效果,需要洗脱下来用n ...

您用过相关的试剂盒么,求推荐
7楼2014-09-12 10:36:53
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Edenberry

铜虫 (初入文坛)

2楼2014-09-12 08:17:20
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479080179

铁虫 (小有名气)


3楼2014-09-12 10:06:15
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zhangyunjing

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
freerf(西门吹雪170代发): 金币+5, 鼓励回帖交流 2014-09-12 10:39:48
你是要研发磁珠法DNA抽提试剂盒吗?
1.关于抽提的细胞中的基因组DNA,首先你要找到合适的裂解液。
2. 磁珠粒径不是关键,关键的是你选的磁珠磁吸附力好,而且结合DNA分子的特异性强,结合时间短,一般用于核酸提取的磁珠的粒径在1 uM左右。
3. 手提的话需要磁力架,生工有卖的,很便宜
4. 去除蛋白、RNA等要在磁珠结合DNA步骤之前,否则磁珠也会结合RNA分子
5. 关于磁珠洗脱条件的控制,因磁珠而异,不同的磁珠洗脱条件差别还是很大的

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rainwater
4楼2014-09-12 10:14:59
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