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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » PH值持续升高，怎么回事
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] PH值持续升高，怎么回事已有10人参与

急急急！向各位高手请教：
拿甾醇为底物，用分枝杆菌来做转化，摇瓶上加2.5%的底物，转化在5--7g/L，按照这个上罐产物达到十一二克应该是没问题的，因为以前做过无数次的实验。可现在在转化到第二天时PH值开始上升，而且上升特别快，直接影响底物转化（以前没出现过这种问题），而且PH值更高时产物也开始下降。
用什么方法能让PH值上升更慢些，刚开始使用过补加葡萄糖，但那只能控制一时，而且糖量太大了也不好。工艺之前基本上已定下来，现在忽然出现这种问题，真的很着急，因为急着生产呢。跪求大家多多提意见和建议，帮俺度过这一时的难关，先送上一百金币，如果问题解决，还有更多。谢谢！
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希望大家多多交流。
1楼2014-09-11 15:07:01
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
补充：培养基里有
葡萄糖，黄豆饼粉，氯化铵，硫酸镁，磷酸氢二钾，磷酸二氢钾，酵母膏等，补料加的是硝酸铵。
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希望大家多多交流。
2楼2014-09-11 15:26:05
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:01:44
磷酸氢二钾，磷酸二氢钾，缓冲体系是两种钾盐？
你可以试试别的缓冲效果好的缓冲体系
再在pH升高时，补料加入酸性缓冲盐，调节pH
不知道可行否，楼主斟酌！
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3楼2014-09-11 17:05:21
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bio_weiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:01:57
考虑是菌体在罐内生长太快，做一个生长曲线与摇瓶中比较。适当降低溶氧水平，培养基中磷的含量，用玉米浆调节ph，控制残氮水平。

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爱知，求真
4楼2014-09-11 18:39:23
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sunqingfeng1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2, ★有帮助, 没有 2014-09-12 15:02:13
变化如此反常，是不是染菌？

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发酵小家
5楼2014-09-12 02:43:47
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2014-09-12 15:02:29
下面这篇文献里提到提高接种良导致PH值上升。可能是由于产氨导致PH上升。你培养基中的有机氮源和硝酸盐都有可能转化成氨。

http://www.ingentaconnect.com/co ... 752d70c7b677f2faf55

文中又引用了另一篇文献。
Zhang Y, Permar S, Sun Z. Conditions that may affect the results
of Mycobacterium tuberculosis susceptibility testing to
pyrazinamide. J Med Microbiol 2002; 51: 42–49.

http://jmm.sgmjournals.org/conte ... =publication_detail
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6楼2014-09-12 05:29:25
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刘军7999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:02:45
增大缓冲液的摩尔数，降低发酵通气量，实在不行，动态添加酸

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好好生活，天天向上！
7楼2014-09-12 06:17:40
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Micah1011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+3, ★有帮助, 做了，没染菌 2014-09-12 15:03:09
镜检过没有？菌株没问题考虑动态加酸

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每天叫醒我的不是闹钟，是梦想；每天让我做实验的不是老板，是兴趣
8楼2014-09-12 07:26:16
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eve_bioc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助, 再试试 2014-09-12 15:03:30
如果是这个发酵只是个别情况，估计和培养基没太大关系，可能是发酵的某个环节出了问题，建议好好找找看。算算碳氮比，可以提前加点多糖。氮源试试硫酸铵
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多做有意义的事
9楼2014-09-12 08:39:33
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨
大伙再帮帮忙呗
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希望大家多多交流。
10楼2014-09-20 09:15:17
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