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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

[求助] PH值持续升高,怎么回事 已有10人参与

急急急!向各位高手请教:
拿甾醇为底物,用分枝杆菌来做转化,摇瓶上加2.5%的底物,转化在5--7g/L,按照这个上罐产物达到十一二克应该是没问题的,因为以前做过无数次的实验。可现在在转化到第二天时PH值开始上升,而且上升特别快,直接影响底物转化(以前没出现过这种问题),而且PH值更高时产物也开始下降。
用什么方法能让PH值上升更慢些,刚开始使用过补加葡萄糖,但那只能控制一时,而且糖量太大了也不好。工艺之前基本上已定下来,现在忽然出现这种问题,真的很着急,因为急着生产呢。跪求大家多多提意见和建议,帮俺度过这一时的难关,先送上一百金币,如果问题解决,还有更多。谢谢!
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希望大家多多交流。
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

补充:培养基里有
葡萄糖,黄豆饼粉,氯化铵,硫酸镁,磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,酵母膏等,补料加的是硝酸铵。
希望大家多多交流。
2楼2014-09-11 15:26:05
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laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:01:44
磷酸氢二钾,磷酸二氢钾,缓冲体系是两种钾盐?
你可以试试别的缓冲效果好的缓冲体系
再在pH升高时,补料加入酸性缓冲盐,调节pH
不知道可行否,楼主斟酌!
3楼2014-09-11 17:05:21
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bio_weiyaya

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:01:57
考虑是菌体在罐内生长太快,做一个生长曲线与摇瓶中比较。适当降低溶氧水平,培养基中磷的含量,用玉米浆调节ph,控制残氮水平。

[ 发自小木虫客户端 ]
爱知,求真
4楼2014-09-11 18:39:23
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sunqingfeng1

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+2, 有帮助, 没有 2014-09-12 15:02:13
变化如此反常,是不是染菌?

[ 发自小木虫客户端 ]
发酵小家
5楼2014-09-12 02:43:47
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RuyangHan

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢! 2014-09-12 15:02:29
下面这篇文献里提到提高接种良导致PH值上升。可能是由于产氨导致PH上升。你培养基中的有机氮源和硝酸盐都有可能转化成氨。

http://www.ingentaconnect.com/co ... 752d70c7b677f2faf55

文中又引用了另一篇文献。
Zhang Y, Permar S, Sun Z. Conditions that may affect the results
of Mycobacterium tuberculosis susceptibility testing to
pyrazinamide. J Med Microbiol 2002; 51: 42–49.

http://jmm.sgmjournals.org/conte ... =publication_detail
6楼2014-09-12 05:29:25
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刘军7999

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助 2014-09-12 15:02:45
增大缓冲液的摩尔数,降低发酵通气量,实在不行,动态添加酸

[ 发自小木虫客户端 ]
好好生活,天天向上!
7楼2014-09-12 06:17:40
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Micah1011

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+3, 有帮助, 做了,没染菌 2014-09-12 15:03:09
镜检过没有?菌株没问题考虑动态加酸

[ 发自小木虫客户端 ]
每天叫醒我的不是闹钟,是梦想;每天让我做实验的不是老板,是兴趣
8楼2014-09-12 07:26:16
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eve_bioc

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
张香玲1017: 金币+5, ★★★很有帮助, 再试试 2014-09-12 15:03:30
如果是这个发酵只是个别情况,估计和培养基没太大关系,可能是发酵的某个环节出了问题,建议好好找找看。算算碳氮比,可以提前加点多糖。氮源试试硫酸铵
多做有意义的事
9楼2014-09-12 08:39:33
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张香玲1017

铁杆木虫 (著名写手)

冷夜雨

大伙再帮帮忙呗
希望大家多多交流。
10楼2014-09-20 09:15:17
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