| 查看: 1651 | 回复: 4 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
提取叶绿体的方法 已有1人参与
|
||
| 求助提取叶绿体的方法步骤或者相关的文献，最好详细些，本人不是学生物的，谢谢，真的谢谢，一点头绪都没有 |
回复此楼» 猜你喜欢
江苏省优青门槛
已经有20人回复
-
心好累。今年我们部门提交了18个项目。中了11了，可惜我的又挂了
已经有10人回复
-
植物学论文润色/翻译怎么收费?
已经有232人回复
-
面上项目计划书
已经有7人回复
-
面上项目计划书附件
已经有9人回复
-
面上项目计划书系统状态
已经有18人回复
-
NSFC-UNEP（与联合国环境规划署）合作项目
已经有33人回复
-
和伊朗人合作
已经有32人回复
-
江苏省自然基金
已经有7人回复
-
生命科学新英文普刊《INVESTIGATION OF LIFE SCIENCE》
已经有6人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 拟南芥RNA的提取
已经有5人回复
- 叶绿素提取的小问题
已经有6人回复
- 提取RNA时磨样的问题
已经有7人回复
- 求助一些在线分析植物线粒体定位的网址，谢谢！
已经有6人回复
- 动物组织DNA提取
已经有18人回复
- 细胞线粒体的蛋白质的提取
已经有4人回复
- 植物叶绿体提取
已经有4人回复
- 提取植物DNA，求助~~~
已经有21人回复
- 叶绿体序列拼接
已经有8人回复
- 求SOD，POD和CAT的测定方法
已经有26人回复
- 提取的大豆RNA条带太多 都什么带！！！
已经有14人回复
- 鱼类线粒体DNA的提取
已经有6人回复
- 天然产物提取中怎样把叶绿素除去
已经有30人回复
- DNA的提取简介，包括法医DNA的提取方法！
已经有54人回复
- 大家都用什么方法提取植物DNA
已经有19人回复
- 求助叶绿体线粒体分离提取
已经有11人回复
- 【求助/交流】DNA提取方法（用于PCR-DGGE）
已经有20人回复
- 【求助】为什么提取叶绿素时干材料一定要用95%的乙醇，而新鲜的材料可以用无水乙醇提?
已经有14人回复
- 【求助】植物提取中叶绿素问题
已经有13人回复
- 【求助/交流】跪求小麦叶绿体DNA的提取方法
已经有5人回复
- 【求助/交流】叶绿体、线粒体提取
已经有4人回复
- 【求助/交流】测定绿藻中叶绿素的实验方法
已经有8人回复
- 【求助/交流】植物蛋白提取方法讨论
已经有14人回复
- 求助叶绿体基因组提取方法
已经有3人回复
lixz11
木虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1524.1
- 红花: 1
- 帖子: 129
- 在线: 69.8小时
- 虫号: 2112563
- 注册: 2012-11-07
- 性别: GG
- 专业: 微生物资源与分类学
5楼2015-09-22 23:51:04
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yangcun: 金币+9, ★★★很有帮助, 谢谢您的帮助，我看条件很苛刻的，零下4度，我们实验室很难达到 2014-09-12 09:07:11
感谢参与，应助指数 +1
yangcun: 金币+9, ★★★很有帮助, 谢谢您的帮助，我看条件很苛刻的，零下4度，我们实验室很难达到 2014-09-12 09:07:11
|
我们实验室用的方法如下: Quick Chloroplasts preparation from Arabidopsis 1- Harvest leaves of 1-2 tray seedlings (better if seedlings were kept in dark for 12h before, to minimize starch) and collected them in chilled water. Let them in cold room for at leat 30 min. Always work at 4°C or on ice! 2- Grind leaves 3 times in 100 to 400 mL HB buffer, using a Waring blender homogeniser (1 time High, 5s ; 3 times Low 3s.): 3- Filter the grindate through 2 layers of gaze and 1 of miracloth. 4- Centrifuge the filtrate 2 min at 2 200 rpm at 4°C, in JA-14 rotor. 5- Resuspend the pellet in as less as possible 1x TE buffer (usually 1 ml per tube) 6- Quantify Chlorophyll * and measure volume. 7- Adjust volume to 50 mL with 1x TE 8- Spin at 3 600 rpm at 4°C for 2 min in swing rotor. Carefully decant the supernatant. 9- Resuspend the chloroplast pellet in 0.6 M sucrose in TE buffer to a concentration of 1-2 mg/mL chlorophyll 10- Let stand for 10 min on ice and then store at –80°C. * Chlorophyll content is measured by diluting 5-10 L of resuspended chloroplasts into 1 mL of 80% acetone. Mix well and spin for 2 min in the microfuge. Remove the supernatant and measure against a blank of 80% acetone in a quartz cuvette at 652 nm. Chlorophyll concentration in mg/mL = OD652 x dilution factor / 36 TE buffer Stock Final concentration Tricine-HCl pH 7.5 50 mM EDTA 2 mM DTT 2 mM HB buffer stock Final concentration Sorbitol (182.2g/mol) 450 mM 1 M Tricine/KOH pH 8.4 20 mM 0.5 M EDTA pH 8.5 10 mM 0.5 M NaHCO3 10 mM 1 M MnCl2 1 mM |
2楼2014-09-11 21:59:09
3楼2014-09-12 15:14:14
4楼2014-09-15 14:54:15
