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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 辣椒DNA提取，跑的电泳图非常诡异，求问题分析
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klot

铁虫 (初入文坛)

[交流] 辣椒DNA提取，跑的电泳图非常诡异，求问题分析 已有7人参与

第一张是昨天晚上跑的，左侧地一个是mark，第二个是空白，后面6个是3个样品，每个样2个孔
电流 180mA
DNA mark 10000bp

第二张是今天上午跑的，因为感觉有什么地方不对，所以进行了一点调整
电压 120V
电流 153mA
DNA mark 10000bp


同学说可能是TAE液有问题，下午或者晚上我打算换一下试试，不知道还可能是其他问题不？会不会DNA根本没出来呢？为什么mark会跑成这个样子？谢谢
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1楼 2014-09-10 11:48:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

zhangyunjing

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
从条带的位置来说，基因组DNA应该没有抽提出来，胶图上的条带可能是RNA
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rainwater
3楼2014-09-11 11:30:48
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普通回帖

bwangel

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-11 09:22:41
先别想的样本，DNA的问题，marker都跑不好就是胶和电解液的问题，或者电泳仪的问题
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2楼2014-09-11 08:38:16
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dls1987

铁杆木虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:27:33
首先 如上所说 marker都跑不好就是胶和电解液的问题，或者电泳仪的问题
其次 孔道有亮的 可能存在蛋白质污染 即蛋白质没有去除干净
最后 条带拖带 多半的由于降解了 这个可以从原材料是否新鲜 操作是否正确等上面寻找原因
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4楼2014-09-12 09:47:52
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紫夜微蓝

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
电压降低一些，调到75V试试。另外胶可能做得有问题，是百分之几的胶？电泳缓冲液成分和浓度有没有问题
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5楼2014-09-12 15:56:26
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dehong1573

至尊木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
很大可能是TAE的问题，是不是忘加醋酸了，记得之前有一次配TAE忘记加醋酸就是这种结果
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科学永无止境,只有合作共享才能更好地……
6楼2014-09-13 09:11:36
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南楚狂人

银虫 (小有名气)
电压再稍微调高一点，根据光谱图，我得出的结论是辣椒的DNA分子链粘在一起了。

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2014-09-13 09:37:13
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laojiu9878

至尊木虫 (文坛精英)

九牛
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-09-14 09:27:24
重新开始，严格按照操作步骤做，提取和电泳技术有问题
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但愿人长久
8楼2014-09-13 10:23:13
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klot

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dehong1573 at 2014-09-13 09:11:36
很大可能是TAE的问题，是不是忘加醋酸了，记得之前有一次配TAE忘记加醋酸就是这种结果

TAE我又重新配置了一次，两次都加了醋酸了。后来发现marker点样量缩小到1uL 就不会托带了，不过抖动的问题还是没有解决
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9楼2014-09-15 13:03:55
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klot

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 紫夜微蓝 at 2014-09-12 15:56:26
电压降低一些，调到75V试试。另外胶可能做得有问题，是百分之几的胶？电泳缓冲液成分和浓度有没有问题

0.7%的胶，昨天我试了一下1%的胶，居然无法显示maker！整个胶白花花一片。。。（我没有忘记加现色剂，用的是 SYBR GREEN I）
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10楼2014-09-15 13:06:00
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