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swach铁虫 (小有名气)
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[求助]
同样的实验操作，同样的试剂，为什么测序结果差很多 已有1人参与
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做nosZ（470）基因的克隆文库，top10感受态细胞，T4的载体，步骤都是一样的，菌落PCR检测有条带。上次挑菌送出去测序，测序结果是467bp作用，NCBI比对之后，结果是不可培养的反硝化基因。可是这次测序回来的结果是1560多bp，NCBI比对全部都是同一种结果，和我要研究的基因一点关系都没有。发邮件给测序公司，他们的解释是：我送去的是质粒，质粒是环状的，不会出现终止峰，是会一直延伸下去的。 我知道的是，测序结果长度是插入片段长度和引物长度的和，所以应该不会有1500多那么长吧？真的是无语了。求大神帮忙！ |
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2楼2014-09-07 09:10:01