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银虫 (初入文坛)

[求助] -80°对酶活的影响已有5人参与

把菌体冻在-80℃一周然后拿出来破碎,对酶活的影响大吗
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liuheys

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-09-03 18:32:33
应该没多大影响,我们实验室是把菌体用buffer重悬后装到管子中直接扔到-80冰箱,放一两个星期没问题。有的实验室是用buffer重悬后用小离心管再次离心,把沉淀直接放到-80冰箱中。化冻时,有直接放到桌子上的,有把离心管放到自来水中的,也有在水浴锅中的,没听说有区别。
7楼2014-09-03 16:07:11
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hongqifei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香,分子生物期待你更多精彩。 2014-09-02 23:09:48
我觉得影响很小,可以尝试做一下。
何须剑道争锋?千人指,万人封,可问江湖鼎峰,三尺秋水尘不染,天下无双。
2楼2014-09-02 22:27:31
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xipha

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-09-03 18:31:57
大多数没影响. 我们有时候也这样. 但是如果真要精确的说的话, 连ATCC也需要把冻在负八十几年的菌重新复苏, 而且我们实验室以前有一批负八十的感受态才放了一年就不好了.说明还是有些酶活和机能会受到冻存的破坏的.
3楼2014-09-03 00:06:56
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zjf710

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-09-03 18:32:11
应该没有什么影响吧,关键是拿出来解冻的处理方式。
我们一般是先在冰上保存20分钟。
如果是复苏细胞,那就要解冻越快越好,能最大限度保存细胞活性。当然,这种方式您不能用,否则破碎时酶都被破坏了。
三人行,必有我师焉
4楼2014-09-03 01:12:31
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