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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 关于Tris-HCl缓冲液的问题
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z631535213

木虫 (正式写手)

[求助] 关于Tris-HCl缓冲液的问题 已有4人参与

配制的Tris-HCl（0.05mol/L，25℃）若干PH区间度的缓冲液用于  病毒DNA的提取与PCR  中。
1.这个缓冲液需要灭菌吗？要是需要灭菌，请问该怎么灭菌？高温高压还是还是用超滤膜？高温高压灭菌后会不会PH有很大的影响呢
2.Tris溶液我能不能配成母液的形式储存，用的时候稀释到需要的程度？
拜谢各位虫友。
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1楼 2014-08-27 11:20:49
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by z631535213 at 2014-08-27 19:57:54
能问一下为什么用于DNA提取灭不灭菌可能问题都不大...

DNA相对较为稳定（不像RNA），所以不太会受影响。
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4楼2014-08-28 08:59:26
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
z631535213: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-09-01 10:36:31
若是用于DNA提取，灭不灭菌可能问题都不大，不放心就过滤一下。
当然可以。我们都是买1M的Tris，pH值可以是8.0， 7.0 或7.5。需要时稀释或者取一点用于配置其他buffer就行了。
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2楼2014-08-27 11:39:27
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z631535213

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by ssssllllnnnn at 2014-08-27 11:39:27
若是用于DNA提取，灭不灭菌可能问题都不大，不放心就过滤一下。
当然可以。我们都是买1M的Tris，pH值可以是8.0， 7.0 或7.5。需要时稀释或者取一点用于配置其他buffer就行了。

能问一下为什么用于DNA提取灭不灭菌可能问题都不大
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3楼2014-08-28 08:57:54
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帖航

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
z631535213: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-09-01 10:36:59
z631535213: 金币+1, ★★★很有帮助 2014-09-01 10:38:24
是的DNA提取一般是不用灭菌的，如果想灭菌可以用湿热灭菌（tris，TES都可以），配置成母液用时稀释，根据Henderson-Hasselbalch方程，pH不会变化，但是实际上有波动，不过影响不大。用缓冲液最重要的是注意缓冲范围，特定温度下查pKa，缓冲范围在pKa±0.5
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5楼2014-08-28 10:19:33
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