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不经一番寒彻苦，怎得梅花扑鼻香。

1楼 2012-12-27 15:26:36

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我也不知道！但是我在上生物分离工程这门课的时候做实验“碱性磷酸单酯酶（AKP）的分离、纯化和鉴定”的时候遇到两种缓冲液：缓冲液Ⅰ：0.01mol/L PH8.0 Tris-HCl(1mM MgCl2+0.16M尿素）、缓冲液Ⅱ：0.01mol/L PH8.3 Tris-HCl(1mM MgCl2+0.16M尿素+1M NaCl) 据老师讲前者洗杂蛋白后者洗AKP出来。

4楼2012-12-29 00:13:58

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ivyvampire

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我们没加过，直接调PH的

6楼2012-12-29 12:09:05

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一步一步

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根据buffer的用途选择，我用的平衡缓冲液是加0.15MNaCl的。有些洗脱液，如碱性洗脱，一般加0.5M的NaCl。

7楼2012-12-29 15:49:17

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cicelyzh

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Tris-HCl缓冲液是不需要加NaCl的。一般是配成1M的母液，pH根据实验需要用HCl调。实验中的缓冲液有需要不同的盐的，盐也是配成母液，一般NaCl配成5M的母液，MgCl2配成1M或者2M的母液。由于这些中性盐是不影响缓冲液的pH，所以只是根据实验需要加入缓冲液的。

9楼2012-12-30 02:44:35

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qianshengguo

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要看你这个buffer到底是做啥用。一般而言，如果不做特殊要求是不用加的。当然你也可以看一看常见缓冲液的标准配方，那可以说是比较正规的。

10楼2012-12-31 08:55:22

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隆溢

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条件中尿素及氯化镁的作用是什么啊？
阴离子交换层析的交换离子是氯离子，增加氯化钠的浓度一是增加氯离子的浓度，二是里面有钠离子，盐浓度增加有利于增加蛋白质的稳定性。

交流学习

11楼2013-01-14 19:12:35

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susizheng

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Tris-HCL不是有不同的PH吗？Tris碱配置用盐酸调pH，好像没有氯化钠吧，你把配方拿上来看看？

Thank-you，so-blue.

2楼2012-12-28 10:47:35

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rebore

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2楼: Originally posted by susizheng at 2012-12-28 10:47:35
Tris-HCL不是有不同的PH吗？Tris碱配置用盐酸调pH，好像没有氯化钠吧，你把配方拿上来看看？

是说用氯化钠来固定离子浓度，我想知道到底有没有这个必要。
因为看配置Tris-HCL这种缓冲溶液时，有的有加氯化钠，有的没加氯化钠。

不经一番寒彻苦，怎得梅花扑鼻香。

3楼2012-12-28 11:25:47

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:20

不需要，，，，先溶tris，用盐酸跳到需要的PH就行了

5楼2012-12-29 11:35:49

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egaoxy

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rebore: 金币+1 2013-01-09 16:36:08

根据你实验的对象确定需要不需要加，就是以前学习过的具体问题具体分析